紫菜藻胆蛋白的制备及其体外模拟消化研究

紫菜藻胆蛋白的制备及其体外模拟消化研究

姚兴存，

舒留泉，

贾维宝，

刘雪

（淮海工学院海洋学院，江苏连云港２２２００５）

摘要：以紫菜为原料，采用藻胆蛋白提取率为评价指标并结合显微镜观察，通过比较水冻融、缓冲液冻融、水溶胀、氯化钙浸提、超声波破碎、酶水解、超微粉碎等方法筛选最佳方法；建立紫菜藻胆蛋白模拟消化模型，以游离氨基酸含量和ＤＰＰＨ自由基清除率作为评价指标并结合ＳＤＳ—ＰＡＧＡ电泳技术考察藻胆蛋白的消化情况。结果表明，磷酸盐缓冲液浸泡辅以超声波破碎技术是藻胆蛋白制备的最佳方法，工艺条件为：磷酸盐缓冲液浓度０．０６ｍｏｌ／Ｌ、超声功率４００Ｗ、处理

时间２０ｒａｉｎ、溶液温度４０℃、料液质量体积比为１ｇ：５０ｍＬ，藻胆蛋白的提取率为７．０５％，在光

学显微镜和扫描电镜下皆观察到紫菜细胞结构与形态的变化；在紫菜藻胆蛋白的模拟人体胃肠消化过程中，紫菜藻胆蛋白的消化主要集中在胃肠液开始消化的３０ｒａｉｎ，随后消化速度趋缓，紫菜藻胆蛋白是容易被消化的优质蛋白质。关键词：紫菜；藻胆蛋白；制备；消化中图分类号：ＴＳ

２５４．１

文献标志码：Ａ

文章编号：１６７３—１６８９（２０１４）０４—０４０３—０６

Ｓｔｕｄｙ

ｏｎ

ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＬａｖｅｒ

ＹＡ０Ｘｉｎｇｃｕｎ，

ＰｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｉｔｓＤｉｇｅｓｔｉｏｎｉｎＶｉｔｒｏ

ＳＨＵＬｉｕｑｕａｎ，ＪＩＡＷｅｉｂａｏ，ＬＩＵ

Ｘｕｅ

（Ｓｃｈｏｏｌｏｆ

Ｍａｒｉｎｅ

Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ－，ＨｕａｉｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ－，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ２２２００５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ

ｒａｔｅ

ｏｆｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｆｒｏｍｌａｖｅｒ

ａｓ

ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ１ｎｄｅｘｃｏｍｂｉｎｅｄ

ｗｉｔｈｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ，ｔｈｅｂｅｓｔｍｅｔｈｏｄｗａｓｃｈｏｓｅｎｂｙｃｏｍｐａｒｉｎｇｗａｔｅｒｆｒｅｅｚｉｎｇａｎｄｔｈａｗｉｎｇ，ｂｕｆｆｅｒｆｒｅｅｚｉｎｇａｎｄｔｈａｗｉｎｇ，ｗａｔｅｒｓｗｅｌｌｉｎｇ，ｃａｌｃｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｅｎｚｙｍｅｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ，ｕｈｒａｆｉｎｅｇｒｉｎｄｉｎｇ．Ｔｈｅｌａｖｅｒｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓｉｍｕｌａｔｉｏｎｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｕｓｉｎｇｔｈｅｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄ

ｃｏｎｔｅｎｔ

ａｎｄＤＰＰＨ

ｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ

ｒａｔｅａｓ

ｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎｄｅｘｅｓ

ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＳＤＳ—ＰＡＧＡｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ｔｈｅｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｄｉｇｅｓｔｉｏｎｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ

ｔｈａｔｔｈｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ

ｂｕｆｆｅｒｉｍｍｅｒｓｉｏｎｃｏｍｂｉｎｅｄ

ｗｉｔｈｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓ

ｒａｔｅ

ｔｈｅｂｅｓｔ

ｔｈｅ

ｍｅｔｈｏｄｏｆｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ

ｗａｓ７．０５％ｕｎｄｅｒ

ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ０．０６ｍｏｌ／Ｌ，ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｐｏｗｅｒ４００Ｗ，ｔｉｍｅ２０ｒａｉｎ．ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ４０℃．ｓｏｌｉｄ—ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ１：５０．Ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｃｅｌｌｌａｖｅｒｗｅｒｅ

ｏｂｓｅｒｖｅｄ

ｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ

ａｎｄｔｈｅｓｃａｎｎｉｎｇ

ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ

ａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｔｈｅ

ｅｌｅｃｔｒｏｎ

ｓｉｍｕｌａｔｅｄｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｄｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｌａｖｅｒｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｉｔｍａｉｎｌｙｏｃｃｕｒｒｅｄｉｎｔｈｅ

ｆｉｒｓｔ３０ｒａｉｎ，ｔｈｅｎｔｈｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓｐｅｅｄｓｌｏｗｅｄｄｏｗｎ．Ｔｈｅｌａｖｅｒｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｅａｓｉｌｙｄｉｇｅｓｔｅｄ

收稿日期：２０１３—０８—０７

基金项目：中央财政支持地方高校发展专项资金项目（ＣＸＴＤｌ２）。

作者简介：姚兴存（１９６３一），男，山东龙口人，副教授，主要从事水产品加工与贮藏研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙａｏｘｉｎｇｃｕｎ＠１２６．ＣＯｌｌｌ

丧矗５生物技木学ｊ艮２０１４年第３３卷第４期４０３