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酵素纯化方法

酵素纯化方法

酵素純化方法

Enzyme Purification

純化酵素前要先把儀器及用具建立好,並熟悉所有的基本操作方法,以免事倍功半;最主要

的純化工具為液相色層分析法,有很多種操作方式,以便應用在各種不同的蛋白質樣本。

1 酵素純化實驗室︰

實驗室的設備與經營管理,在有形或無形中,影響實驗的品質或其成敗甚鉅。

1.1 儀器:

a. 基本設備:

小型儀器可歸納成 電泳 與 層析 兩大類,大型儀器主要有 離心機 及 光度計 兩類。

(1) 基本設備有: 純水製造系統、製冰機、高速冷凍離心機 (20,000 rpm)、微量離

心機、電泳及轉印系統 (包含供電器)、ELISA光度計,及各種層析管柱系統 (包

含分劃收集器)。其中電泳與層析包含很多獨立的小型器具,使用上較複雜。

(2) 個人電腦及周邊: 今日的實驗室已經離不開電腦,不管是套裝軟體或者網路的

應用,都不可缺乏。

(3) 進一步的設備有: 超高速離心機、冷凍乾燥機、超微膜過濾系統、雙向電泳、

等電焦集電泳系統、分光光度計 (UV及可見光)、HPLC或FPLC。

(4) 特別的設備有: 液相閃爍計數器、原子吸收光譜分析儀、毛細管電泳,其他貴

重儀器如:蛋白質定序儀、質譜儀、影像分析系統、分子結構電腦工作站。

b. 儀器管理及使用:

(1) 每件儀器應指定專人管理,負責保管零附件、說明書,並做初級保養。儀器若

不能正常使用,並發揮其最大服務功能,則其設置純為枉然。

(2) 光學或精密儀器,應放在有除溼機的密閉室;發熱的器具應當集中放在通風良

好處,並且注意電容量是否足夠,以免過荷造成災害。

(3) 使用儀器前,要先熟悉操作法;有問題必請教管理人,使用前後應登記 (登入、

登出),有任何毛病要立刻反映,不可隱瞞。

c. 冰箱:

(1) 應妥善規劃貯位,詳細表列內藏物品;藥品分類用小盒裝在一起 (貨櫃化),勿

零散堆積,以免臨時翻找費時,導致冰櫃失溫。

ECX 2005 109

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