双荧光素酶报告基因检测试剂盒

双荧光素酶报告基因检测试剂盒

双荧光素酶报告基因检测试剂盒

(Dual-Lucy Assay Kit)

产品说明：

报告基因检测，是真核基因表达调控研究的常用方法。由于检测光量子的方法非常敏感，采用生物发光(bioluminescent)法，是报告基因检测最常用的有效手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化，发射出光子。萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海肾荧光素酶(Ranilla luciferase)催化的发光反应，具有相似的光学特征和很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围)，酶的检测灵敏度达10-18mol到10-20mol，但两者催化的化学反应底物和最适反应条件完全不同。这两种荧光素酶配合形成了十分有效的双荧光素酶报告基因系统，其中Ranilla luciferase通常作为内参照。

本试剂盒提供了一体化形式的双荧光素酶检测系统。采用通用裂解缓冲液，适合于两种荧光素酶活性的保持，且与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容；优化的两种酶反应体系，使每种发光反应持续数十分钟，以便于手工操作多个样品；并保证Firefly luciferase发光及时淬灭，不影响后续Ranilla luciferase的测定；优化的反应体系还使两种荧光素酶活性比值趋于合理的敏感范围，更有利于后续数据的比较。

产品内容与储存方法：名称

5x Universal Lysis Buffer (通用裂解液)

Fassay Buffer I (虫酶缓冲液)

Fassay Substrate I (虫酶底物)

Rassay Buffer II (海酶缓冲液)

Rassay Substrate II (海酶底物) 数量 25 ml 10 ml 0.5 ml 10 ml 0.2 ml 保存条件 -20℃ -20℃ -20℃ -20℃ -20℃

可作100次双荧光素酶检测。低温运输，-20℃或-80℃避光保存。有效期6个月。

所需其它试剂：

使用者需准备PBS 、双蒸水等。

操作方法：

裂解细胞：

1) 新鲜配制裂解液：临用前，取适量5xUniversal Lysis Buffer (ULB)，用双蒸水稀释至