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单细胞真菌药敏试验方法的探讨

维普资讯 doc.guandang.net C N P L CHE LT HI A UB I A H V 1 j o j v2 0中国公共卫生 2 0 o . 8N jNo 02 0 2年第 l 8卷第 l期 l

文章编号:0 10 8 (0 2 1—4 80 1 0—50 20 ) 110—1

【研究简报】

单细胞真菌药敏试验方法的探讨 华北煤炭医学院生物科学系 (山唐 0 3 0 )张淑杰马立人 6 0 0

中图分类号:39 R 7近十多年来。着临床上器官移植和外科其他介入性治随疗的开展,疫抑制剂、肿瘤药物和广谱抗生素等广泛的应免抗用,时某些新的免疫缺陷性疾病如艾滋病的不断出现,条同由件致病性真菌 .其是单细胞真菌 (部真菌 )起的感染日尤深引 趋严重 l。在对系统性真菌感染的治疗中也不断发现耐药 1]

文献标识码: B 康唑和特比奈酚的联合抑制结果, MI即 C为 0 5 g ml ( ) . ̄/。 3液体稀释法:酒酵母菌对咪康唑和特比奈酚的单敏和联敏啤结果比较见表 1。

表 1 2种方法的药敏结果比较 ( gmI p/ )

株,借助于药物敏感性试验进行抗真菌药物的选择越来越故被人们所关注。本文用单细胞真菌对咪康唑、比奈酚的单特 敏、敏试验及琼脂稀释法进行了初步探讨,望能为机会性联希真菌感染疾病的临床诊断与药物治疗提供重要参考依据。 材料与方法 ( )验菌株的菌液制备:验菌株采用啤 1试试讨论结果表明,比奈酚对单细胞真菌的抑菌效果较特酒酵母菌 A TC 7 6标准侏 (自中科院微生物所 )将试 T 93购。

验菌株接种沙保弱氏培养基上,0温箱培养 7 h至少传代 3℃ 2, 2 3代 .确保纯度及试验菌浓度。将上述培养物用液体沙 .以氏基洗下菌苔制成菌悬液,振荡器上振荡 1s用分光光度在 5,计测其菌浓度 3×1 0 f/,种时再将其用 p 7 0的 R— 0 u ml接 c H . P MI 6 0培养液稀释 10倍,最终试验菌浓度为 3×1 . 4 1 0其 0 c/。每试验管接种量为 10 1( )真菌药物稀释液的 f ml u o; 2抗

咪康

唑好。且两种抗真菌药物联合使用对单细胞真菌显示而出有较强的协同效果。 评价药物敏感性最基本的方法之一就是测定其 MI对 C,单细胞真菌的药敏试验一般提倡采用液体稀释法。本试验采用琼脂稀释法。试单细胞真菌对咪康唑、比奈酚的单敏及测特联敏试验的最低抑菌浓度,液体稀释法比较,用琼脂稀释与采法结果更准确,易观察判读。但基于 MI的测定方法很更 C多,法不同其影响因素亦很多【,所用培养基的成分和方 4如] p值、种菌浓度、育温度和时间以及终点判读等误差, H接孵给

制备:验均采用 1mm×10试 3 0 mm标准的无菌试管,真菌药抗粉为精确配制的 2咪康唑、%特比奈酚 (山利康制药% 1唐 厂 )用 8的二甲基亚砜 (i ty uf ii, MS作为溶,% d meh l l xdd D O) s e e剂,别配制咪康唑、比奈酚的单敏、敏的药液原浓度备分特联用,验时再进行 2倍顺序稀释成使用浓度。 ( )养基及试试 3培

真菌药物敏感试验的标准化带来一定难度,因各实验室很又难取得比较一致的可重复性结果,本试验结果仅供临床抗故 真菌感染治疗作为参考。关于抗真菌药物的敏感试验在临床应用及其标准化工作,后还需要更多的大量实验研究来加今 以证实。 作者简介:淑杰 (9 3一)女 .北任邱人。副教授 .要从事张 15,河主医学微生物学和医学免疫学基础理论教学及科研工作。 参考文献

剂:保弱氏培养基、菌药敏实验用培养基 (用改良马丁沙真采氏 )按文献{进行。所用各种试剂如 DMS R MI14 均 2 3 O、 P一6 0培养液等均由本院生物科学系试验中心细菌学实验室提供。 ( )法:敏、敏试验均采用琼脂稀释法【。试管培养基 4方单联 3]总量为 5/ .敏及联敏试验各管的药物浓度 ( gm1为: ml管单 ̄/ ) 51 25 2, 6,1 8,64,32,1 2 6,8,4,2, 1,0. 5,0. 25,0. 3,0. 6, 1 0

0 0。并设空白对照,个浓度平

行 3次,种菌液为 10 1 .3每接 0 ̄,

放 3℃温箱培养 7 h记录结果。同时采用液体稀释法,上 0 2.对述 2种药物进行单敏、敏试验。 ( )果判读:脂稀释法联 5结琼以肉眼观察真菌生长完全被抑制的最低抗真菌药物浓度既为该菌的 MI液体稀释法以肉眼观察真菌生长受抑 7%时的 C; 5 最低药物浓度(晰 )判读终点。清为 结果 ( )敏试验结果;酒酵母菌 A C 7 6标准 1单啤 TT 9 3

[]高世成 .兮 . V/ D 1王 HI AI S患者口腔念珠菌病研究进展[]国外 J.医学 .行病学传染病学分册,0 1 2 ( )2 1 4 .流 2 0, 8 6:4—2 3[]马绪荣 .德模药品微生物学检验手册[]北京科学出版 2苏 M . 社 . 0 1 2 6—2 8 4 8—4 3 2 0:0 2 .0 6.

[]李仲兴,家剂,家宏诊断细菌学[]香港:河文化出版 3郑李 M .黄 社 .9 2 5 8 8 . 1 9 . 7—5 6[] E pn l n c f A. i J, r r gT M, t 1C l b rt e 4 s ie I g of ks C W r KeKei e . ol o ai — h n a a v c m p rs n o r t c o i t n a d mir d l t n a t u g l U— o a i fb o h ma r d l i n c o i i n i n a S o u o u o f S

株对咪康唑的 MI为 3 ̄/、比奈酚的 MI为 4 g m。 C 2 g ml特 C ̄/ l ( )合药敏试验结果:酒酵母菌 A C 76标准株对咪 2联啤 TT 9 3

cpiit ts J JCi M io il1 9, 0 3 3 . et ly et] l c bo, 9 2 3:1 8 bi s[ n r (0 20—6收稿 2 0—62 2 0—42 0 20—1修回李溪莹编辑孔繁学校对 )

无误文字精炼,次清楚,写工整规范。层书 ,

3打印格式 . 格式 4全文字数 . o

所投稿件应使用无恪白纸,般用小 4号以上的宋体字打印,留至少 1的行间距,便审修;得一保倍以不

正过一 r 7以上版本使用反双面打印和复印件投稿;于潦草的稿件恕不予受理。电子邮件或软盘投稿,律使

用微软 Wod9论著、究报告、述、评以及较大型的调查研究文稿,字数 (g中英文摘要和图表 )超过 5 0研综述总 f括不 00

字;般性研究、查监测、生监督或实验方法不超过 20一调卫 6 0字;型常规性调研监测、情的报告等不超过 10字。小疫 20 ● ” . . .◆ . I◆ . I . _◆ -. .”~◆ ...¨ . I◆ _-◆ -r .一 .I◆ _◆ _¨ l .‘ .◆ . l .| . 1◆ .. .1◆ .-◆“◆ . -◆ _-~ ◆ ◆ . . . . . -‘. . . . . .1. . .◆ . -◆一 .-◆”◆‘◆ _ I1

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