土壤微生物的分离纯化及理化性质的研究

土壤微生物的分离纯化及理化性质的研究(微生物的综合实验论文)

土壤是微生物生活的大本营，不同土壤中各类微生物的数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次是放线菌和霉菌。其中，大多数细菌的最适宜pH为6.5-7.5，放线菌一般生活在较干燥、偏碱性、有机质丰富的土壤中。要想从土壤中获得某种微生物的纯培养，可以采用平板划线法进行分离纯化，借助沾有菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物细胞在平板表面分散，经培养得到分散成为由单个微生物细胞繁殖而成的菌落，从而达到纯化目的。利用选择培养基抑制其他菌的生长而使某种菌充分生长的特点，结合牛肉膏蛋白胨培养基和高氏1号培养基可分别选择出细菌和放线菌。通过该实验学习从样品中分离不同微生物的方法，掌握梯度稀释法、平板划线法和斜面接种等方面的无菌操作技术，熟悉对微生物观察与研究的方法，如影印法观察放线菌，革兰氏染色法观察细菌，分光光度计计数法研究细菌的理化性质（pH）等。微生物与人类息息相关，它对人类的假定贡献和无法估量的开发潜力。为我们展开了广阔的应用前景，所以研究微生物的生命活动有着重要意义，其中 pH与微生物的生命活动有密切联系。为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将进一步探究 p H 对微生物的影响。为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将进一步探究pH对微生物的影响。

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1.材料与方法

1.1材料

研究材料：土壤（于实验前采集后马上进行稀释，制备菌悬液）

1.2方法

1.2.1梯度稀释法（稀释）

A.称取土样2.00g，在火焰旁加到一个盛有48ml无菌水并装有玻璃珠的100ml锥形瓶中。振荡20-30min，使样品中的菌体、芽孢或孢子均匀分散。静止20-30s，标记为编号1。

B.按照一定的梯度进行稀释（该实验采用20倍梯度）

①取3个各装有9.5ml无菌水的25ml锥形瓶，分别按照顺序标记好2、3、4.

②在无菌操作台上，用微量移液器从1号锥形瓶中移取0.5ml土壤悬液加到2号锥形瓶中，摇匀后，再用微量移液器从2号锥形瓶中移取0.5ml土壤悬液加到3号锥形瓶中，依此类推，分别将土壤悬液稀释20、400、8000倍