利福平对小鼠肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2表达与定位的影响

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中国药理学通报

C i s P am cl i l u en 2 1 e;6 1 ) 18 6 hn e hr ao gc lt 0 0D c2 (2:5 1~ e o a B li

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利福平对小鼠肝细胞胆汁酸转运体 Be sp和 Mr2表达与定位的影响 p 曹云海陈，熙张，程石嫦娥徐德祥许建明。,,, 202 30 2; ( .徽医科大学第一附属 I院消化科，徽省消化系统疾病重点实验室，徽合肥 1安 K .安安

2 .安徽医科大学卫生毒理学系，安徽合肥

203 ) 3 02

中国图书分类号：一3; 2 . 7 R 3 9 2; 7 .; R3 2 R 3 24; 2 .4 R 5 5 5 R 78 9 .3

药 1,细胞 Be周肝 sp和 Mr2 m N表达水平均未发生变 p R A

化。结论利福平 ( im i n I具有肝毒性， Rf pc,RF) a i但其机

肝细胞胆汁酸转运体 B e sp和 Mr2定位改变可 p

文献标识码：文章编号：0 1—17 (0 0 1 A 10 9 8 2 1 )2—18~ 6 5 1 0

能是 R F诱发肝内胆汁淤积的重要机制。 I 关键词：福平；汁淤积；损伤；汁酸转运体；汁酸输利胆肝胆胆 出泵；药抵抗相关蛋白一多 2

摘要：目的

制尚不清楚。本研究在 R F诱导的肝内胆汁淤积小鼠中， I探 讨 R F对肝细胞胆汁酸转运体胆汁酸输出泵 ( i a x ot I bl sl epr e t p m, sp和多药抵抗相关蛋白一( hdu s t c—— u p Be) 2 mu irgr ia ea esn s sc t rti一，Mr2表达和定位影响。方法 oie po n2 ad e p) 4 8只早

已知利福平 ( i m ii,R F具有肝毒性， Rf pcn I ) a但

IR小鼠随机分为 4组， I k组： C R F 1w经灌胃给予 R F 20 I ( 0 mg ~ )连续 1周， k d,于末次给药后 6h取材； I RF6 h组：单次灌胃给予 R F 20 m I ( 0 g k ) 6h取材； I g后 RF1 周对照组 ( O k与 R F6h对照组 ( O )经灌胃 C N 1w ) I C N 6h: 给予等容积生理盐水。所有小鼠均收集血液和肝组织，规常

其引起肝毒性的机制尚未阐

明。早期的临床研究发现 IJ利福平能够明显升高人血清胆汁酸浓度。 2, 近期有关利福平引起胆汁酸升高机制的研究表明 J利福平抑制大鼠肝细胞胆汁酸转运体有机阴， 离子转运多肽 2( ra i a i rnpr n oye— og nc n n t sot gp l p o a i p t e ap )导的牛磺胆酸盐的摄取。进一步研 i,O t2介 d

生化检测血清丙氨酸氨基转移酶 ( )天冬氨酸氨基转移 A、酶 ( S )碱性磷酸酶 ( L )总胆红素 ( B和结合胆红素 AT、 AP、 T ) ( B)并检测小鼠血清和肝组织总胆汁酸 ( B水平。H D, T A) E染色分析肝组织病理改变。 R—C T P R测定肝脏肝细胞胆汁酸

究发现，表达人类胆汁酸输出泵 ( i a x o 在 bl sle pr e t t p mp B e )昆虫细胞中，福平抑制 B e导 u, sp的利 sp介

转运体 B e sp和 Mr2m N p R A表达。免疫荧光法分析 B e sp和 Mr2在肝细胞的位置。结果 p给予 R F 1周后，鼠血清 I小 T B由 ( .5 .0 6 12 4 .9) p o -, l L上升至 ( 5 7 4 1. 8 m 6 . 3. 2 0 ) -

的牛磺胆酸盐的转运。我们的前期研究显示 J利， 福平能引起小鼠肝内胆汁淤积，且使肝细胞问紧并密连接的完整性发生改变。

t o ~,升近 7 x l L上 m 0倍， B由( . 7- .0 x o 上 D 07 4 4 )￣ l L - 0 m升至 (33 5 . 3±1 .3) I l L~,升约 8倍， L由 24 x mo上 0 AP ( 1. 41 . )U 上升至 (7 . 48 . )u 10 2. 3 8 - L 29 5. 0 4 - L~,升上

胆汁酸转运体在胆汁酸的合成、取、摄排泌及重吸收过程中起重要作用。肝细胞合成的胆酸、脱鹅氧胆酸与甘氨酸和牛磺酸结合后形成初级胆汁酸， 由肝细胞顶端膜上的胆汁酸转运体 B e sp和 Mr2分 p泌到胆管中。在雌二醇 . 1D一糖苷酸引起的大 13葡 7一 鼠肝内胆汁淤积模型中，细胞膜 B e肝 sp和 Mr2的 p

约 15倍，B . T A由( . 54 .9 z l 上升至( 3 5 4 3 1 0 8 )t - mo L 1.4. - 6

5 )I o . 1 x l L~,升约 5倍并伴有血清 A T和 A T轻度 m上 L S升高；脏组织 T A由 ( .5±00 )￣ o g。i r升 肝 B 01 . 4 x l 。 l e上 m v至 ( . 0. .9 mo g le,升约 2倍；脏组织 H 03 4 1) - 0 l i r上 v肝 E染色显示肝细胞出现脂肪变性、度坏死和炎症。单次给予轻

完整性被破坏， sp和 Mr2从肝细胞毛细胆管膜 Be p向胞质内陷。;。在脂多糖 (i0 o sch r e L S 1 p l ac ai, P ) p y d诱发的大鼠肝内胆汁淤积动物模型中， sp和 M p Be r2 的完整性在 L S处理后 2 P h即迅速发生改变。而

R F6h后血清 T D、 L、 T、 S I B、 B A P AL A T和 T A明显上升， B但 未观察到小鼠肝脏组织病理发生改变。免疫荧光分析显示，

给予小鼠 R F1w I k与单次给予 R F6h后肝细胞中 Be I sp和 Mp r2的定位发生了改变。而无论单次给予 R F还是连续给 I 收稿日期：00— 8— 4,回日期：0 0—0 2 21 0 2修 2 1 9— 0基金项目：安徽省自然科学基金资助项目( o0 0 1 12安徽省教 N 9 4 34 );育厅自然科学研究项目( o2)5 3 5 c N【】kI z ) ( 9作者简介：云海 ( 9 3一)男，曹 18,硕士生， i:w 13 qy 16 Ema q e2 4 t@ 2 . l c n; oi

迄今未见在实验动物体内研究利福平对胆汁酸转运 体影响的报道。因此，研究旨在阐述在实验动物本

体内利福平对肝细胞胆汁酸转运体的影响。 1材料与方法

1 1主要试剂与材料 .

I R小鼠( 8周，4~ C 6~ 2

2 )购于北京维通利华公司 ( i l i r; I 6g, Vt v ) R F购 aR e

陈

熙(9 8一)女，士，副教授，主任医师，士生 16,博副硕

自 Sg a公司；汁酸 L K检测用试剂盒从 Da— im胆 3 i g nscC e cl公司购买；R egn试剂盒购自 ot hmi s i a T IR aet Mo clr eerhC ne公司；异性引物由上海 l ua sac e t e R r特

导师，研究方向：物性肝病，讯作者，— i ce x

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