鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2基因突变对细胞嗜性改变的研究

为研究鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)细胞嗜性改变的分子基础,本研究通过定点突变、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术,以vvIBDV HLJ-0504株为骨架构建了两组感染性克隆,并借助已建立的反向遗传操作技术进行病毒拯救。IFA检测、电镜观察及RT-PCR鉴定均显示：Q253H/A284T双点突变的pCAGGHLJ0504A889/980HRT和pCAGGHLJ0504BHRT共转染DF1细胞成功拯救出重组病毒(rHLJ0504HT),

第 3卷第 1 2 0期 21年 00 1月 0

中国预

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医学报

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鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株 V 2基因突变 P对细胞嗜性改变的研究 高立，祁小乐，高玉龙，高宏雷，秦立廷，邓小芸，李凯，王笑梅 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室，黑龙江哈尔滨 10 0 ) 50 1

摘要：为研究鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株(vB V N￣嗜性改变的分子基础，本研究通过定点突变、 vlD ) g 重叠延伸 P R( O—C等技术，以 v l DV H J0 0 C S E P R) vB L一5 4株为骨架构建了两组感染性克隆，并借助已建立的反向遗

传操作技术进行病毒拯救。 I检测、电镜观察及 R—C鉴定均显示： Q5/￣双点突变的 F A TP R Z A T 3 H p A G L00A 8/ 0 R C G H J54 899 H T和 p A G L00B R 8 C G H J54 H T共转染 D 1胞成功拯救出重组病毒 ( L0 0H ) F细 r J54 T,而未 H 进行双点突变的 p A G L0 0A R C G H J54 H T和 p A G L0 0B R c G H J54 H T共转染组未获得重组病毒。上述结果表明，双点 突变 Q 5 A T能使 wI Dv H J0 0 2H/ * 3 4 B L一5 4适应非允许细胞 C F E,但未进行 Q/ q双点突变的 v l DV H J0 0 H A￣" vB L一54

不能感染非允许细胞 C F E,因此，该研究表明 V 2的 Q H A P /两个氨基酸突变是 wID细胞嗜性改变的分子 B V 基础。

关键词：传染性法氏囊病超强病毒株；病毒拯救；细胞嗜性中图分类号：￥ 5 .5 8 26 文献标识码：A文章编号：1 0 -5 92 1 )00 4—5 0 80 8 (0 0 1—7 70

Mo e u a a i fc l to im fv r i l n n e t u l c lrb ss o e l r ps o

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鸡传染性法氏囊病 ( fcosbra dsae I etu usl i s, n i e I D是由 ID病毒 ( D ) B ) B I V引起的一种危害鸡的急 B * Core p d n uho r s on i g a t r

性、高度接触性传染病[ 1 _强致病性 ID (vB。超 B V v I. D经传代致弱能够感染非允许细胞鸡胚成纤维细 V)

收稿日期：2 1-1 3 000 . 2

基金项目：国家“ 7目”(0 5 B 2 2 2;国家自然科学基金 (0 0 0 3;中国博士后科学基金(0 8 4 02 ) 9 3项 20C 530) 3 9 18 ) 20 0 4 9 1 作者简介：高￣ (93) .18一，女，山东泰安人，硕士研究生，主要从事动物病毒学研究 . 通信作者：Ema:x@h r a. — i mw vi cc l . n