快速高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中5类33种药物残留

建立了快速高效液相色谱-串联质谱法(RRLC-MS/MS)同时测定水产品中四环素类、喹诺酮类、磺胺类、磺胺增效剂和三苯甲烷类共5大类33种药物残留的方法。样品用Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液及乙腈提取,正己烷脱脂后,用RRLC进行分离。在电喷雾正离子模式下,以动态多反应监测(Dynamic MRM)方式采集数据进行定性与定量分析。33种药物在相应的浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99;在

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分析化学

第 4卷 O

浴式氮吹浓缩仪 (上海安谱科学仪器有限公司) XW一0; 8A快速混匀器 (门市麒麟医用仪器厂 )海。 四环素 ( C、霉素 ( T )金霉素 ( T )强力霉素 ( X)于中国药品生物制品检定所；诺沙 T )土 O C、 C C、 DO购依星 ( NO)氧氟沙星 ( F )诺氟沙星 ( 0 )培氟沙星 ( E )环丙沙星 ( I)洛美沙星 ( 0、 E、 O L、 N R、 PF、 CP、 L M)丹诺沙星(A、 D N)恩诺沙星 (N )沙拉沙星 (A )双氟沙星 ( l)司帕沙星 (P R、胺醋酰 (A )磺胺甲噻 ER、 SR、 DF、 SA )磺 SA、

二唑 ( MT )磺胺二甲异恶唑 (F )磺胺氯哒嗪 ( C )磺胺嘧啶 (D )磺胺甲基异恶唑( Mz、 s Z、 SZ、 SP、 SZ、 s )磺胺噻唑 (T )磺胺甲基嘧啶 (MR、 SZ、 S )磺胺吡啶( P )磺胺二甲嘧啶 ( D、胺苯吡唑 ( P )磺胺对甲氧嘧 SD、 S M)磺 SA、啶 ( MD)磺胺邻二甲氧嘧啶 ( D、 S、 S X)甲氧苄氨嘧啶 ( MP、雀石绿 ( T )孔 MG)隐性孔雀石绿 ( MG)结、 L、 晶紫 ( V)隐性结晶紫 ( C,代孔雀石绿 ( - )氘代隐性孔雀石绿 ( M D )于德国 C、 L v)氘 MG D5、 L 6购 Dr E rn tre . h e so fr公司。

标准溶液的配制：甲醇为溶剂，分别配制质量浓度为 10/用 0 0mgL的标准储备溶液，置棕色容量瓶避光 4℃保存，用时根据需要，临用初始流动相稀释成适当浓度的混合标准溶液， 0 2经 . m滤膜过滤 2 后作为工作液。

乙腈、醇、甲酸、酸 (谱纯 )酸性 Al、檬酸 ( H O)乙二胺四乙酸二钠甲乙色；:柠 O, CH O 、 ( aE T N: D A H O、 aH O 2 ) N P 1H 0(析纯， 2:分广州化学试剂厂 )实验用水为二次蒸馏水。; N 2 D A Mcla e冲溶液 ( . mo/)称取 1. aHP 4 2 2 1. 柠檬酸，7 3g乙 aE T— l i缓 vn 01 l: L 0 2gN 2 O 1H O,29 g 9 3 3 . 2二胺四乙酸二

钠，解于 1L水中，溶 摇匀后用 0 l C调至 p . . mo/ H I 1 L H4。 5 2 2样品前处理 .

准确称取匀质试样 5 (确到 0 1g, 5 L聚四氟乙烯离心管中，入 1 0 0/ . g精 0 . )置 0m 0加 0 L 5 gL内标溶液， . mo/ aE T - l a e冲溶液， 2mL01 l N 2 D A Mcl i缓 L v n涡旋混合 1mi;入 1 n加 0mL乙腈，涡旋混匀 2mi n后，超声提取 1 n以 4 0/ n离心 1 n取全部上清液于 10mL烧杯中； 0mi, 0 0r mi 0mi, 0向残渣加入 4 . g酸性 0 A, 1 O,充分搅匀；加入 1 0mL乙腈，涡旋混匀 1mi, n超声提取 1 n以 4 0/ n离心 1 i, 0mi, 0 0r mi 0m n合并上

清液： 4于 5℃水浴氮吹浓缩至约 2m转移至 1 L刻度梨形瓶中；乙腈洗涤烧杯多次，涤液合并 L, .m 0用洗 入梨形瓶中，续在 4继 5℃氮吹浓缩至 1 。加入 1 0乙腈溶液，匀，入 3mL正己烷除 . mL 0 . mL 5% 0混加 脂，下层溶液，过 0 2u滤膜后备用。取 . m 2 2 3色谱一谱条件 .质

B y es 8 DSH pri C柱色谱柱 ( 0 l 10mmX21m 2 m)柱温：0℃;速： _ mLmi;样量： L; . m,. 4; 3流 03/ n进 5 流动相：为 O% (/甲酸+ 1 mo/ A . 4 v v) 0m l L乙酸铵溶液， B为 0% ( v) . 4 v/甲酸一乙腈；度洗脱程序：梯 0~ 1 i 1%~ 8% 0 r n, 0 a 0 B; 31 1 i 1% 1 .~ 6 m n, 0 B; 0 l i 8%~ 1 0 1~ lm n, 0 0% B。 B;1~ 1 it 1 0 1 3 m t, 0% B;1~ 1 . i 3 3 1r n,1 0~ 1% a 0% 0

电喷雾离子源 ( S)正离子扫描模式；态多反应监测采集方式；燥气温度：5 E I;动干 3 0℃;干燥气流

量：0 / n雾化气压力：7 P; 1 . Lmi; 0 2 6k a毛细管电压： V; 1 MS 4k MS及 2均为单位分辨率；3种药物及 2种 3 同位素内标 ( - MG D5和 L - 6的质谱采集参数见表 1 MG D )。在进入质谱前，

色谱柱流出液经六通阀切换至

废液中， 1 i从 .m n起切换至质谱中采集数据， 1. m n束， 5至 3 i结 0六通阀将色谱柱流出液切换至废液中。 2 4测定方法 .

取样品溶液和混合标准溶液各 5 . 0

注入快速液相色谱一串联四极杆质谱仪进行测定，以其标准溶

液峰的保留时间和 D MR两对质谱监测离子对为依据进行定性分析， M以定量离子对的峰面积计算样品中相应待测物的含量。

3结果与讨论 3 1质谱条件的优化 .

根据待测物的化学结构， 5待测物均适合在 E I的正离子模式下进行离子化，母离子均为这类 S源其

[ M十H r。将 3种标准品储备液用甲醇稀释成浓度为 0~1 g 5 . .m/ 5 0 L的标准品混合溶液。在 E I+) S(模 式下，分别对待测物进行质谱参数优化。先根据药物的相对分子质量通过选择离子监测优化碎裂电压

使[ M+H+】的响应最大；以其为母离子，对其子离子进行全扫描分析，通过优化碰撞能量使得子离子的