乙型肝炎核心抗原检测及临床意义的探讨
113 仪器 全自动酶联免疫分析仪(FAME)。114 HBVDNA检测 部分标本进行了HBVDNA
检测,实验由我院生化科协助进行。2 结 果
乙型肝炎表面抗原阳性标本的几种检出模式与HBcAg的检出比较见表1;对其中部分标本的HBVDNA检测结果与HBeAg、HBcAg的比较见表2。
表1 乙型肝炎几种阳性模式与HBcAg检出阳性率(%)
阳性模式
n
HBcAg
阳性数
阳性率
HBsAgHBeAgHBcAb807188175HBsAgHBeAg1111100100HBsAgHBeAbHBcAb17529140
HBsAgHBcAb500.005项全阴
20
0.00
表2 HBVDNA与HBeAg、HBcAg检测阳性率(%)
项 目
HBeAg
HBcAg
n
阳性数阳性率
n
阳性数阳性率
HBVDNA阳性
6666100
665888阴性
5
5
5
4
80
表1中HBsAgHBeAgHBcAb阳性及HBsAgHBeAg阳性时,HBcAg的阳性分别是8817%和100%。表2中HBVDNA阳性标本的HBeAg、HBcAg阳性率分别为100%及88%。3 讨 论
HBcAg是HBV的核心部分,它是HBV感染和
复制的直接标志。由于它被乙型肝炎表面抗原所包裹,因此一般的血清学方法不能将其检测出来,临床上常以检测乙型肝炎5项来判断HBV的感染情况1。本研究采用深圳三九基因工程有限公司生产的检测HBcAg试剂,可以直接检出HBcAg,试剂操作方便,为HBcAg的临床检测打下了基础。本研究中,HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性时,HBcAg的检出率为8817%;HBsAg、HBeAg阳性时,HBcAg的检出率为100%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性时,HBcAg的检出率为29%,由此看出HBcAg的检出主要差异在HBeAg/HBeAb之间。HBeAg主要出现在HBV感染的早期,它的出现标志着病毒的复制,有较强的传染性;HBeAb的出现则预示着病情趋向好转,这时体内的HBeAg逐渐消失,病毒的复制减弱,传染性减少
2
;HBeAg与HBcAg为
病毒复制的中间产物,均为C基因区编码,它们之
间的密切基因位置关系决定了它们有较高的表达符
合性。
从表1中可以看到,22例HBeAg阴性标本中有5例HBcAg阳性,其原因可能是:(1)HBeAg浓度较低不能检出或HBeAg阴性;(2)病毒变异,不能表达出完整的HBeAg,但这时病毒仍处于复制状态,仍有较强的传染性。由以上结果可以看出,乙型肝炎5项的检测可以反映出大部分患者HBV的感染情况,但开展HBcAg的检测可以更全面准确地反映HBV的感染程度及复制情况。有一点值得注意的是,本研究中HBcAg/HBcAb同时阳性率为75147%,它也说明,血中的HBcAg在刺激机体产生
抗2HBc以后仍然存在于血液中,只是绝大多数处于包裹状态,不能被常规方法检测出来,但它也不被HBcAb清除,并且不影响HBcAb的检出。
用PCR方法检测HBVDNA能够最准确的反映病毒的复制情况2。但因其成本高、操作复杂及实验环境要求高等因素限制,难以作为常规方法来检测HBV的感染。表2结果显示,HBVDNA阳性时,HBeAg和HBcAg的阳性率分别为100%及88%,表明它们反映病毒复制情况的一致性;对这12%HBcAg阴性、HBVDNA阳性的结果我们认为可能有以下原因:(1)HBcAg试剂质量问题(灵敏度、特异性);(2)标本中HBcAg的含量低于试剂能检出水平,我们发现这12%标本中,HBVDNA的拷贝数均<103,这说明HBV的复制水平很低,因此HBcAg的含量亦低;(3)病毒变异。从理论上说,用荧光定量PCR方法是判断乙型肝炎病毒复制的灵敏度最高的检测方法,但在试验操作中也存在着DNA的提取不纯、试验方法的误差、污染等而使试验结果呈假阴性或假阳性,从而影响PCR方法的准确性。本研究中就出现了HBVDNA阴性而HBeAg和HBcAg阳性的情况。由于HBeAg和HBcAg及HBVDNA均是反映病毒复制的指标,而
从实验结果看它们其中之一又没有较高的优越性,所以我们认为一般情况下可以用HBeAg及HBcAg的检测代替PCRHBVDNA的检测来反映HBV的复制。
(本研究中乙型肝炎DNAPCR检测承生化科邓心新主任技师进行实验,在此表示感谢。
)参考文献:
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2
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DNA对判别病毒复制临床价值的探讨J.
中华医院感染学杂
志,2002,12(2):1482149.
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