反复冻融法和手持式测定仪测水中叶绿素的比较分析

第 8期 2 0 1 3年 8月

广东水利水电 GUANGD0NG W ATER RES 0URCES AND HYDROPOW ER

No .8 Au g . 201 3

反复冻融法和手持式测定仪测水中叶绿素的比较分析 林鸿敏 (广东省水文局肇庆水文分局，广东肇庆 摘

5 2 6 0 6 0 )

要：通过对比传统的反复冻融法和手持式测定仪测定水体中叶绿素的含量，根据比对结果提出较佳的测定方法。 文献标识码：B 文章编号：1 0 0 8~ O 1】 2 ( 2 0 1 3 ) 0 8— 0 0 5 1— 0 4

关键词：叶绿素；反复冻融法；手持式测定仪中图分类号：X 8 3 2

在地表水环境的富营养化研究中，叶绿素是表征

的碳酸镁悬浊液，以防止酸化引起的色素溶解。

浮游植物生物量的最常用指标之一。水质监测技术规范中规定湖泊水库叶绿素属于常规监测项目。本文叶绿素的测定方法主要依据中华人民共和国水利行业标

1 . 3 . 2反复冻融法分析步骤 1 )抽滤将微孔滤膜放置在连接有真空泵的抽滤器上，根

准《 s L 8 8 -2 0 1 2 )…。传统的反复冻融法存在耗时长、 提取不完全、步骤繁琐等缺点，且使用的试剂丙酮对 监测人员的人身健康存在较大危害。C h l o r o T e c h l 2 1 B 型手持式叶绿素测定仪是用来检测水中叶绿素的荧光 计，其工作原理是：叶绿素分子在吸收光能后，会激发出一种波长较长、能量较低的红光 (通常称之为叶

据水样中叶绿素的浓度准确量取定量体积的混均水样进行抽滤，抽滤时负压不应超过 2 0 k P a,逐渐减压， 在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤。用镊子小心将滤膜取出，将有样品的一面对折，用滤纸吸干剩余 水分。 2 )提取

绿素荧光 )。叶绿素分子越多，吸收和释放的能量就越多，发射出的荧光也就越强。通过测量荧光的强弱 度即可知道叶绿素的含量。 1 反复冻融法与手持式测定仪的比对试验

将过滤后的滤膜放入具塞玻璃离心管中，盖紧塞 帽，放人一 4 0℃低温冰箱中冷冻 2 0 ai r n,取出放置于室温下 5 m i n,此过程反

复 3次。向离心管中加入 1 0 r n L 9 0%丙酮溶液，盖紧塞帽剧烈摇振片刻，放置

1 . 1仪器和设备

于 4℃冰箱中避光浸泡 4~1 2 h备用，在浸泡过程中 应再摇振 2~ 3次。 3 )离心

岛津 u V一 2 4 0 1 P C紫外一可见分光光度计，8 0— 2 台式低速离心机，海尔 D W一2 5 W1 9 8低温冰箱，津腾 G M一 0 . 3 3隔膜真空泵，抽滤器，培养皿、具塞玻璃

将离心管放人离心机中，以 3 5 0 0 r/ ai r n的速度离 心 1 5 mi n。

离心管和 C h l o r o T e c h 1 2 1 B手持式叶绿素测定仪。 1 . 2试剂和材料

4 )测定

反复冻融法所需试剂：1%碳酸镁悬浊液，9 0%丙酮溶液，0 . 1 mo l/ L盐酸溶液。 手持式叶绿素测定仪所需试剂：超纯水。

将离心后的上清液倒人 1 c m比色皿中，以 9 0%丙酮溶液做参比，分别在 7 5 0 1 1 1 1 1、6 6 4 n m、6 4 7 i l m、 6 3 0 i l m波长处测定吸光度值。

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分 析纯试剂和纯水。 1 . 3实验步骤 1 . 3 . 1水样的采集

5 )数据计算由实验测得的吸光度值，按公式 ( 1 )~( 3 )计算水体中叶绿素的浓度：

根据不同的水体，采集 5 0 0~l 0 0 0 m L水样置于 棕色玻璃瓶或深色塑料瓶中，每升水样加入 1 mL 1% 收稿日期：2 0 1 3—0 4—1 2;修回日期：2 0 1 3— 0 7— 0 4 作者简介：林鸿敏( 1 9 8 5一),男，本科，助理工程师，主要从事水环境监测工作。

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