物质的分离和检验——纸上层析
一、纸上层析基本原理:
主要是利用混和物中各组分在流动相(有机溶剂)和固定相(水)间的分配比的不同而使之分离。纸上层析是以滤纸作为惰性支持物,附着在纸上的水是固定相,不与水混溶的有机溶剂作为流动相。亲脂性强的成份在流动相中分配的多一些,随流动相移动的速度就快一些,亲水性强的成份在固定相中分配的多一些,随流动相移动的速度就慢一些,随有机溶剂的移动而展开,达到分离的目的。如果试样中的离子是有颜色的,则可在滤纸的不同高度看到不同离子的色斑,如果是无色离子,则可用适当的方法使其显现出来。
纸上层析不仅可用于化学性质相近的混和物的分离,还适宜于微量物质的鉴别。而且使用的仪器简单,操作比较容易,重现性好。目前,纸上层析已运用到有机化学、无机化学、生物化学及生理学的定性、定量分析中。例如利用纸上层析法使蛋白质所包含的几十种氨基酸在一张滤纸上全部分离开;又如在稀有、稀土、放射性元素和核裂解产物等的分离和鉴定上,也用纸上层析法,都有较好的效果。 纸上层析法有上升纸层析法和径向纸层析法两种:
二、课堂实验P206“纸上层析检验Fe3+和Cu2+”实验试剂及仪器的准备:
丙酮、6mol/L盐酸,FeCl3和CuCl2的混合溶液,浓氨水
毛细管,滤纸,带钩子的橡皮塞,试管,培养皿,表面皿
三、操作步骤:
1、配制展开剂:用丙酮9mL,6mol/L盐酸1mL配成展开剂。
2、装置制作:滤纸剪成约2cm宽,18cm长(保证下端能浸入展开剂中1cm)的滤纸条,一端用钩子固定在橡胶塞上,在另一端距滤纸条约2cm处用铅笔画一小圆点。
3、点层析试样:配试样后,用毛细管蘸取试样在“原点”处点直径0.3-0.5cm的斑点,晾干或用吹风机吹干后再点。重复2-3次。
4、层析操作:展开剂不可沾到试管壁,点样后的滤纸条不可接触试管内壁,滤纸条下端浸入展开剂中1cm,注意不要让试样点触及展开剂。
5、显色反应:注意观察滤纸条上色带的变化,滤纸条取下后用氨气熏,观察颜色变化。
四、实验注意事项:
1、为防止水解,在FeCl3和CuCl2的混合溶液中可加少量HCl酸化。
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