现以等电点法提取大豆蛋白为例:
大豆 粉末 浸取
① ②
残渣干燥、分析 酸沉 离心取沉淀 水洗离心取沉淀 ③ ④ ⑤ 残渣干燥、分析 溶解中和干燥、分析 ⑥
注:
① 用0.01mol∕L Nacl溶液浸取,用NaoH溶液调节浸取液PH为7.5—9.0(8.0为宜)[梯度7.5、8.0、8.5], 温度30℃~60℃(室温亦可), 每10mL浸取中加入1g大豆蛋白粉末,在振荡器上震荡1~2h。
② 、⑤ 离心10~30min,转速4000r∕min ③ 用盐酸或乙酸调节溶液PH为3.0—6.0(4.5为宜)[梯度4.0、4.5、5.0],沉淀时间为0.5~1h,轻微震荡
④ 用0.5mol∕L Nacl溶液溶解沉淀并搅拌
⑥ 搅拌溶解,用NaoH溶液、盐酸调节溶液PH至7.0
A .植物蛋白中主要含有清蛋白类(可以溶于水、稀酸、稀碱、稀中性盐中)和球蛋白类(优
球蛋白不溶于水,溶于稀酸、稀碱、稀中性盐中;拟球蛋白则全溶)。
B.待用等电点法取得一定量蛋白产品后,再用等电点法确定最适于蛋白质溶解的PH及PI。
盐析法、有机溶剂法亦可用这些蛋白产品来确定有关溶剂的适宜浓度,最后实验时对这些浓度进行微调以确定最佳。
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