安徽农业科学。JournalofAnhuiA矛.Sci.2010,38(28):15583—15585
责任编辑姜丽责任校对况玲玲
正交法优化蛹虫草子实体多糖的提取工艺
陈,J、丽1,2,巫光宏2,古青霞3,黄卓烈2‘
摘耍[目的]采用正交法优化蛹虫草(Cordyceps
(1.广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;2.华南农业大学生命科学学院,广东广州
51filM2;3.广东省深圳市澎源生物科技有限公司,广东深圳518000)
militarisL.Link)予实体多糖的提取工艺。[方法]采用优化煎煮法、水热回流提取法和
碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺。[结果J煎煮法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入40倍体积的水,提取3次,每次3.0h,备因素影响得率的主次顺序为:料液比>煎煮时间>煎煮次数。水热回流法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入20倍体积的水,80℃下提取2次,每次1.0h,各因素影响得率的主次顺序为:提取次数>提取时间>提取温度>料液比。碱法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入8倍体积的0.7mol/LNaOH溶液,提取3次,每次0.5h,各因素影响多糖得率的主次顺序为:浸提次数>NaOH
浓度>料液比>浸提时间。[结论】该研究找出了煎煮法、水热回流提取法和碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺,可为下一步研究及工
业生产提供参考资料。
关键词蛹虫草;多糖;煎煮法;水热回流法;碱法中囫分类号S567.3+5文献标识码A文章编号0517—661l(2010)28—15583—03
ExtractingProcessofPolysaccharidesfromFruitingBodyofCultured
Cordyceps删皿讯妇by
OrthogonalDesign
al(CollegeofFisheries,GuangdongOceanUniversity,Zhanjiang,Guangdong524088)
Abstract[Objective]There.archaimedtooptimizetheextractingprocessofpolysaecharidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsm靠tamL.Linkbyorthogonaldesign.【Method]Threeextractingmethods,decoctingextractionmethod,hydmthermalrefluxingextractingmeth odandalkaliextractingmethodwereusedtoextractpolysaccharidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsmilitarisL.Link.[Result]11le
et
CHENXiao U
optimumconditionofdecoctingextractionmethodextractingpolysaccharidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsmilitarisL.Linkwasa8follow:thesamplepowderwasmixedwithwateratratioof1/40,boiling3.0h,andrepeatingfor3times,andtheorderof3factorsonthe
polysaccharidesrateWasratioofwatertosample>decoctingtime>decoctingtimes.111eoptimumconditionofhydrothermalrefluxingextrac—tingmethodextractingpolysaccharidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsmilitarisL.Linkwasasfollow:thesamplepowderWasmixedwithwateratratioof1/20,refluxing1.0h,repeatingfor2times,andtheoMerof4factorsonthepelysaccharidesratewasextractingtimes>extractingtime>extractingtemperature>ratioofwatertosample.11leoptimumconditionofalkaliextractingmethodextractingpolysac—
charidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsmilitarisL.Linkwasthatusing0.7moL/I。NaOHextracting0.5hfor3timesattheratioofsamplepowdertoNaOHsolutionl:8.andtheorderof4factorsonthepolysaecharidesratewasextractingtimes>concentrationofNaOH>ratioofsample
powder
to
NaOHsolution>extracting
method
time.[Conclusion]Thestudyfinds
out
thebest
process
ofdeeoctingextractionmethod,
hydrothermalrefluxing
tar/s
extracting
and“kali
extracting
next
methodextractingpolysacchafidesfromfruitingbodyofculturedCordycepsmini-
L.Link,canofferthereferencedatafortheresearchandindustrialproduction.
-【eywordI鼻CordyeepsrailitarisL.Link;PolyⅨmchacides;Decoctingextractionmethod;Hydrothermalrefluxingmethod;Alkaliextractingmethod
蛹虫草(Cordyce声militarisL.Link)又称北冬虫夏草,与冬虫夏草同属异种,两者有效成分的种类及含量接近,而蛹虫草人工培养较为成功。蛹虫草多糖是一类高分子复合物,是蛹虫草中含量最高的药理活性物质,具有抗衰老、抗氧化、
见表l。分别称取过100目筛的菌粉10g,按表l参数于100℃下煎煮;每次煎煮完后于4℃、10
1300
r/rain下离心lO
min,取上清液。残渣再按相应条件煎煮、离心,合并上清液,即得粗多糖溶液。
表1
Table
1
抗凝血、降血糖和降血脂等作用…。近几年,关于蛹虫草的
人工培养及其活性成分的研究相对活跃起来¨。“,但关于人工蛹虫草中活性多糖成分的研究报道相对较少。为此,笔者比较了3种人工蛹虫草子实体多糖的提取工艺,以期找出最佳提取工艺,为下一步研究及工业生产提供参考。l‘材料与方法
1.1材料蛹虫草子实体由深圳澎源生物科技有限公司提
煎煮法提取多糖的影响因素与水平设计
Factorsand
levels捌驴of
theeffectsof
tiVOli
p吨芦即曲aride弹
by
decoctingextractionmethod
tosolventextractiontimemethodtimes
供。将人工培养的蛹虫草子实体用粉碎机粉碎,菌粉过100
日筛,备用。
i。:方毒
1.2.1提取方法。
1.2.1.1煎煮法。根据文献[8—10]及预试验结果,选择影
1.2 1.2水热回流法¨卜123。准确称取5g过100目筛菌粉,按表2的设计加入相应倍数纯水,热回流提取一定时间和次数,每次提取完毕后于4℃、10
000
r/min下离心10
响多糖提取率的3个因素进行正交试验。因素与水平设计
基金项目作者简介
广东省自然科学基金项目(7300680);华南农业大学横向项
目(4600-1108046)。
min,取上清液。残渣按相应条件提取多次,合并上清液,即得粗多糖溶液。
1.2.1.3碱提取法¨””1。根据预试验结果,选取4个主要因素进行正交试验。因素与水平设计见表3。蛹虫草子实体经热水提取多糖后的残渣于3000r/rain下离心10rain,弃去上清液,称取残渣lOg,浸提后于10000r/rain离心10min。弃去沉淀,取上清液,即得粗多糖溶液。
陈小丽(1978一)。女.湖北十堰人,在读博士,讲师,从事生物化学研究。 通讯作者,硕士,教授,博士生导师,从事生物化学方面的研究。E-mail:u198820l@126.cam
2010旬5.24
收藕日期
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