微生物菌种保藏方法概述

通过自然分离、人工选育或基因工程构建得到的微生物种系,是生物学研究的常用材料以及工业生产的重要原料,保持微生物种系的稳定是保证后续实验和生产顺利进行的前提,因此微生物菌种的保藏是微生物研究的一项重要课题。介绍了几种常见微生物菌种的保藏方法并阐述了它们的优缺点。

第4期 (总第 2 7 7期) 21 0 2年 4月

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文章编号：17— 6 6 (0 2 4 0— 2 6 1 94 2 1)0 - 17 0 1

微生物菌种保藏方法概述 梁宁利 (宝鸡出入境检验检疫局，陕西宝鸡 7 10 ) 2 06摘要：通过自然分离、人工选育或基因工程构建得到的微生物种系，是生物学研究的常用材料以及工业生产的重要

原料，保持微生物种系的稳定是保证后续实验和生产顺利进行的前提，因此微生物菌种的保藏是微生物研究的一项重要课题。介绍了几种常见微生物菌种的保藏方法并阐述了它们的优缺点。 关键词：微生物；菌种；保藏 中图分类号：Q 3 9文献标志码：A d i 0 9 9 i n1 7— 6 6 X) 0 2 4 3 o:1. 6/s . 19 4 ( . 1. . 4 3 js 6 2 00

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1微生物菌种保藏原理 各种微生物菌种保藏方法的主要原理是根据不同微生物的生理生化特点，人为创造缺氧、低温或者干燥的条件，降低微生物的新陈代谢，使其生命活动基本处于停滞或者休眠状态，停止生长繁殖的微生物，其遗传物质自然会更加稳定。因此微生物的性状在这种条件下保持稳定，达到维持种系的目的f1 l。 - 3以下介绍的保存方法大致可以分为两类：①在基质中低温的保藏方法，包括斜面、半固体穿刺、石蜡、 沙土管保藏法。这类保藏方法通过稍降低温度辅以 缺氧及减少养分供给等方式，以降低微生物的新陈代谢，从而达到较长时间保藏菌种的目的。②在保护剂中超低温保藏，也包括真空干燥冻存法。通过保护剂减少溶液结晶，平衡微生物细胞内外渗透压， 保证微生物的生存，同时把温度降低到冰点以下使微生物的新陈代谢完全停止。这类方法虽然操作复杂，要求的硬件条件较高，但可以实现很长时间保持菌种稳定的目的。

2微生物菌种的常用保藏方法及其优缺点

2斜面低温保藏法 . 1 211方法介绍 ..

将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上， 在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子， 随后密封试管置于 4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。保藏时间依微生物的种类从 1个月到 4个月不等。 2 12方法优缺点 ..

此法适用范围广 (细菌、霉菌、放线菌、酵母均适用),操作简便，成本低廉，恢复方便，人员能随时对微生物的状态进行观察。缺点是保藏时间较短，需要经常传代处理，因连续传代而容易引入基因突变或者杂菌，培养基的理化性质及微生物代谢产物等原因还会导致微生物性状发生改变。因此斜面低温保藏法适于短期保存常用菌株，而且应该与其他能够长期保存菌株的方法相结合防止种系丢失【 2】。 2液体石蜡保藏法 . 2 2 .方法介绍 .1 2

此法是斜面低温保藏法的一种改进

,只需将无 收稿日期：2 1- 2 1 0 11—5

作者简介：梁宁利 ( 8一 ) 1 1 9,女，陕西人，助理工程师，研究方向：食品检验。E m r ln nl4 1 i . m - a: i鲥 g5 1@sa o。 l a i nc