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发布日期：[2009-12-7] 共阅[735]次
不连续SDS-PAGE
一、原理及目的（略）
二、试剂
1、30%丙烯酰胺贮存液：29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中，验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中，4℃保存。
2、1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液
3、10% SDS溶液
4、10%过硫酸铵：新鲜配制
5、TEMED溶液：4℃保存
6、1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液
7、2×样品溶解液：2%SDS，5%巯基乙醇，10%甘油，0.02%溴酚蓝，0.01mol/L Tris-HCl（pH8.0）缓冲液。
8、5×Tris-甘氨酸电极缓冲液：每1000ml该溶液中，含15.1g Tris，94g甘氨酸和50ml 10%（W/V）SDS贮存液。
9、固定液：冰乙酸:甲醇:水=1:2:7
10、考马斯亮蓝R染色液：每100ml甲醇、水、冰乙酸混合物（9:9:2）中，溶解0.25g考马斯亮蓝R，过滤除去未溶物。
11、脱色液：甲醇:水:冰乙酸=9:9:2
注：1、2、5、6、7由教师提供，其余由学生自己配制，其中8可在凝胶凝固的过程中配制，9、10、11在电泳时配制。
三、操作步骤：
1、准备步骤
1）将凝胶板依次用水、SDS、水、无水乙醇、水洗涤干净，然后使其自然风干或烘干。
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