快速测试片在食品微生物检测中的应用

快速测试片在食品微生物检测中的应用

中国卫生检验杂志2006年5月第16卷第5期　ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,May2006;Vol16　No5635

【综述】

快速测试片在食品微生物检测中的应用

吴清平,孙　永

1

1,2,3

,蔡芷荷,郭伟鹏

41

(11广东省微生物研究所,广东省菌种保藏与应用重点实验室,广州　510070;21中国科学院武汉病毒研究所,武汉　430071;

31中国科学院研究生院,北京　100049;41广东环凯微生物科技有限公司,广州　510070)

[关键词]　微生物检测;快速测试片;载体;Petrifilm;食品

[中图分类号]　TS201113　　　　[文献标识码]　A　　　　[文章编号]　1004-8685(2006)05-0635-03

　　随着人们生活水平的不断提高,食品安全问题越来越受到人们的重视,微生物对食品的污染问题也相应地备受关注。在食品生产、加工、储存、运输、生物的可能。一旦污染,变质,,病菌的种类越来越多,病原微生物对人类的威胁越来越大。为了防止此类事件的发生,采用适当的检验方法来对食品进行检测,是预防食源性中毒的重要手段。利用传统的检测方法,主要包括形态检查和生化方法,其准确性、灵敏性均较高;但涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重,而且要有大量人员参与[1,2]。为此,人们相继提出了一系列简便、快捷、敏感、准确的检测新思路。快速测试片法是近年来不断取得进展的一种新型的检测方法。

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体,将特定的培养基和显色物质附着在上面,通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法[3]。1955年,德国学者FJ1Forg发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法-纸片法,使原来的检测周期由72h缩短到15h,材料成本降低了3/4,同时大大简化了操作程序[4]。从此,这种集化学、高分子学和微生物学于一体的检测方法开始发展起来。近年来以滤纸和美国3M公司的Petrifilm为载体的测试片已开始被广泛应用

[5]

,,这样导致许多,。,大大缩短了时间,对照[]:

表1　快速测试片检测细菌和真菌培养时间(h)种类细菌总数大肠菌群大肠杆菌金黄色葡萄球菌霉菌酵母菌

常规法

4872～9624096～12072～120

检测纸片

16～1816～1824//

3M测试片

48244824～2672～120

1　以滤纸为载体的测试片111　菌落总数测试片

[6]

筛选白色、无毒、中速、密度均匀、吸附力合格的滤纸,将滤纸裁剪成合适的尺寸,通常410×510cm大小。将灭菌的

TTC加入到无菌的培养基后,将无菌滤纸浸入其中,根据需要

控制滤纸的培养基吸附量,以适宜的温度干燥,分装于已灭菌的聚丙烯塑料口袋内,密封备用。

TTC(氯化三苯四氮唑)是一种氧化还原指示剂,接受氢后

。

可形成非水溶性的红色三苯甲脂。形成红色点状物出现在滤纸之上,计数红点的多少,即为细菌总数。由于过量的TTC可抑制细菌生长,TTC用量选择应以不抑制菌体生长,又能灵敏显示细菌数目为宜。使用时把1ml待测液加于纸片上,压平后置于37℃培养箱中培养16～18h,即可计数。检测纸片为一次性使用,使用后焚烧处理即可。通过实验对快速测试片法和国标方法进行对比,结果显示两种方法在统计学上无显著性差异,但由于滤纸具有较大的间隙,菌体长在纤维之间而使肉眼无法判断,所以一般比实际菌数要少。

112　大肠菌群测试片

采用快速测试片检测具有显著的优点[1,6,17]:第一,快速测试片可测定少量检品,不需要配制试剂,不需要大量的玻璃器皿,操作简便迅速;易于消毒保存,便于运输,携带方便,价格低廉,加之除纸片外无其他任何废液废物,大大减少或消除对环境的污染,以及试验后的清洗工作,减少了工作量。另外,避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷,故适用于实验室、生产现场和野外环境工作使用。第二,快速测试片可以在取样时同时接种,结果更能反映当时样本中真实的细菌数,防止延长接种时间时由于细菌繁殖造成的数量增多。第三,

北京赛帝克生物技术有限公司、广东环凯微生物科技有

[基金项目]　广东省科技计划项目(C12105)

[作者简介]　吴清平(1962-),男,研究员,主要从事生物安全与

限公司等生产该产品[7]。目前,大肠菌群检测纸片已在全国各地疾病预防控制中心实验室广泛应用,食(饮)具大肠菌群纸片检测法已被列为中华人民共和国国标。李洪等通过大量

食品检测研究。