当前位置： 文档下载 > 所有分类 > 自然科学 > 生物学 > 配置Sf9细胞培养液方法Sf9细胞培养液配置方法
1. 消毒烘干下列用品
500毫升玻璃瓶：两个（其中一个灌装500 毫升高洁水备用）
玻璃烧杯：一个、玻璃量筒： 一个
2. 准备下列设备
天平、搅拌器、称量纸、量勺、75%酒精、酒精棉球、试验用手套
3. UV消毒
用清洁液擦净洁净台；工作区域用酒精拭擦一遍。所有准备好的用品和设备预先放进洁净台；UV消毒至少2个小时；工作前关闭UV灯，打开内置灯和风扇
4. 称量
用称量纸称出相当于制备250毫升培养液的粉末(约11.7g)，倒入玻璃烧杯中
5. 溶解、定容
将玻璃烧杯至于搅拌器上，缓缓加入约100-150毫升的清洁水。将搅拌器调至低速，缓缓搅拌；溶解过程中不能产生泡沫，产生泡沫意味着蛋白变性；将溶解后的培养液加入到量筒内；必要时补充水量直至250毫升。
6. 调节pH
按4.7mL 7.5%NaHCO3/L培养液的比例加入NaHCO3，逐滴加入1N NaOH至pH值为
5.9。过滤后培养液pH值为6.2左右。
7. 过滤
用无菌针筒将培养液缓缓通过0.22m的过滤膜过滤，必要时更换新的过滤器；过滤液直接进入消毒玻璃瓶中。
8. 加入双抗和FBS
按照相应比例，加入1%双抗和10%胎牛血清。
9. 标记、保存
过滤后的培养液要标明制备日期。根据使用需要可将培养液分别保存在4度或-20度。 4度保存的培养液使用不超过1周；-20度保存的培养液使用不超过一个月。
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