一种用于胚胎免疫荧光染色的新载体

江苏农业学报 ( J i a n g s u o fA g r . S c i . ), 2 0 1 3, 2 9 ( 4 ): 8 1 2~8 1 7 8 l 2

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刘章晓孝 d o i: 1 0 . 3 9 6 9/ j . i s s n . 1 0 0 0 - 4 4 4 0 . 2 0 1 3 . 0 4 . 0 2 1 蕊荣 刘晓蕊，万小凤，蒲

勇，等.一种用于胚胎免疫荧光染色的新载体[ J] .江苏农业学报， 2 0 1 3, 2 9 ( 4 ): 8 1 2 . 8 1 7

一

种用于胚胎免小疫荧光染色的新载体 亚

万支

蒲勇 , 李巧丹， 刘亚莉， 周娜汝， 章美玲， ( 1 .安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥 2 3 0 0 3 6;2 .安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室，安徽合肥 2 3 0 0 3 6;3 .安徽省羊繁育工程技术研究中心，安徽合肥 2 3 0 0 3 6 )

摘要：用铝塑泡罩包装板在即将凝固的不同浓度琼脂糖 ( 2%、 3%、 4%、 5%)溶胶板上压制小孔，用作

胚胎免疫染色操作载体，比较以琼脂糖凝胶孔为载体和以一次性细胞培养皿为载体进行胚胎免疫染色的效果。结果表明，以琼脂糖凝胶孔作为载体进行胚胎免疫荧光染色与传统载体染色效果相同，但避免了操作过程中由于胚胎与载体的黏附而造成的诸多不便；以3%琼脂糖凝胶孔为载体孔内液体损失率最小；琼脂糖凝胶板在 4℃保存至少两周不影响其使用效果，并可反复使用。琼脂糖凝胶孔较传统载体更适于进行胚胎免 疫荧光染色。

关键词：胚胎；免疫荧光染色；琼脂糖凝胶中图分类号： Q 9 5 4 . 4 文献标识码： A 文章编号： 1 0 0 0 44 4 0 ( 2 0 1 3 ) 0 4 - 0 8 1 2 - 0 6

A n e w me d i u m f o r e mb r y o i mmu n o lu f o r e s c e n c e s t a i n i n g

L I U X i a o . r u i ' , WA N X i a o . f e n g , , P U Y o n g , , L I Q i a o . d a n , , L I U Y a . 1 i , , ZHANG Me i . 1 i n g , ZHANG Xi a o . r o n g

' , LI U Ya , ,

Z HO U N a . r u , ,

( 1 . C o l l e g e fA o n i m a l S c i e n c e s a n d T e c h n o l o g y, A n h u i A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y, H e f e i 2 3 0 0 3 6,C h i n a;2 . A n h u i P r o v i n c i a l L a b o r a t o r y f o r L o c a l L i v e s t o c k a n d P o u l t y r G e n e t i c R e s o u r c e C o n s e r v a t i o n a n dB i o— b r e e d i n g, He f e i 2 3 0 0 3 6,C h i n a;3 . E n g i ce n r i n gR e s e a r c h C e n t e r fR o e p r o d u c t i o n a n dB r e e d i n gi n S h e e p fA o n h u i P r vi o n c e, H e f e i 2 3 0 0 3 6,C h i n a)

Ab s t r a c t:

Th e t r a d i t i o n a l me d i u m f o r e mb r y o i mmu n o l f u o r e s c e n c e s t a i n i n g i s a d i s p o s a b l e c u l t u r e d i s h,e mb yo r

a d he s i o n— p r o n e,whi c h i s u n f a v o r a b l e f o r t h e f o l l o wi n g r e s e a r c h e s .I n t h i s s t u d y,i ns t e a d o f t h e di s h,a g a r o s e wa s u s e d a t

d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s( 2%,3%, 4% a n d 5% )f o r e m b r y o i mm u n o l f u o r e s c e n c e s t a i n i n g b y p r e s s i n g a a l u m i n i u m一 p l a s t i c bl i s t e r p a c ka g e o nt o i t . The r e s u hs o f

收稿日期： 2 0 1 3 4 ) 1 - 3 0

i m mu no lu f o r e s c e nc e s t a i n i n

g us i n g t wo d i f f e r e nt me d i um

基金项目：安徽省自然基金项目( 0 9 0 4 1 3 0 8 8 );安徽省长三角联合攻关项目( 1 2 0 1 e 0 6 0 2 0 0 7 );国家“ 8 6 3”项目( 2 0 0 8 A A 1 0 1 0 0 3 . 1 )

( a g a r o s e g e l h o l e a n d t i s s u e c u l t u r e p l a t e )w e r e c o n— p a r e d .T h e s t a i n i n g e f f e c t o f e mb r y o i n a g a r o s e g e l h o l e wa s t he s a me a s t ha t s t a i ne d i n di s p o s a bl e c u l t ur e di s h,

作者简介：刘晓蕊( 1 9 8 6 . ),女，河北石家庄人，硕士研究生，研究方向为哺乳动物胚胎工程。 ( T e 1 )1 8 7 5 6 0 9 8 5 9 1;( E— ma i l ) l x r 8 6 0 71 6@ 1 6 3 . c o n

b u t t h e n e w me d i u m c o u l d a v o i d e mb yo r a d h e s i o n .T h e mi n i mum l o s s o f l i q ui d wa s i n 3% a g a r o s e g e l ho l e.

通讯作者：章孝荣， ( T e 1 ) 1 3 5 0 5 5 1 2 4 1 6; ( E - ma i l ) x r z h a n g@a h a u . e d u . c n。刘 e d u . C n

whi c h wa s t h e mo s t s u i t a b l e a s me d i u m or f i mm u no luo f—

亚， ( T e 1 ) 1 5 9 0 5 5 1 4 9 1 8; ( E— ma i l ) l i u y a@ a h a u .

r e s e e n e e s t a i n i n g .T h e g e l p l a t e c o u l d b e r e u s e d a f t e r s t o r e d a t 4℃ or f a t l e a s t t wo w e e k s .I t i n d i c a t e d t h a t