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siRNA沉默MEKK3基因促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞的凋亡

目的:研究抑制促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶-激酶3(mitogen—activated protein/extraeellular signal regulated kinase—kinase3,MEKK3)基因表达促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用,寻找乳腺癌临床治疗新策略。方法:应用MTT法检测人TRAIL对MCF-7细胞生长的抑制作用。合成MEKK3-siRNA,应用脂质体介导MEKK3-siRNA转染人人乳腺癌细胞MCF-7,以RT,PCR和W

中国肿瘤生物治疗杂志

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55 2

C i a c rBoh r hnJC n e ite,De .2 0 c 0 8,V 1 1 o. 5,No .6

DI132.n 0-5 0 0 O: .7js.03X 280 0 08/i 178 0 6 1 s

础研究 基

s N沉默 ME K i A R K 3基因促进 T AI R L诱导乳腺癌 MC一胞的凋亡 F7细 刘寿贵刘磊周晓健郭善禹 ( .,,, 1上海交通大学医学院附属第九人民医院普外科,上海 20 1; . 00 1 2上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科,上海市口腔学重点实验室,上海 20 1 ) 0 0 1 [摘要]目的:研究抑制促分裂原活化蛋白激酶/ 细胞外信号调节激酶一激酶 3 mi gnat a dpo i et cl l i a ( t e—cvt rtn x ae u r g l o ie e/ r la s n rglt i s.i s, K 3)因表达促进 T AL诱导乳腺癌 MC - eua dkn ekn e ME K基 e a a 3 RI F7细胞凋亡的作用,寻找乳腺癌临床治疗新策略。方法:应用 MT T法检测人 T A L对 M F7细胞生长的抑制作用。合成 ME K一 R A, RI C- K 3s N应用脂质体介导 ME K一 R A转染人 i K 3s N i 人乳腺癌细胞 MC -, R C和 Wet nboig检测 MC -胞 ME K R A和蛋白的表达。应用 M r法和流式细 F7以 TP R s r ltn法 e t F7细 K 3m N T

胞术检测 M K 3s N E K一 R A与 T A L联合处理后 M F7细胞的增殖和凋亡。结果:R I i RI C- T A L具有抑制 MC - F7细胞增殖作用,但 其抑制作用较弱。ME K一R A转染后能有效而稳定地抑制 MC - K 3s N i F7细胞中 ME K N K 3mR A和蛋白的表达 ( 0 0 ) R I P< . 1。T AL

与 ME K一iN K 3s A联合处理 MC - R F7细胞较 T A L单独处理更明显地抑制细胞增殖活力( 0 0 )更明显地增加细胞凋亡率 RI P< .5, ( 0 O )结论:iN P< . 1。 s A沉默 ME K R K 3基因能显著促进 T A Lx .腺癌 MC一 R I C L ̄ F7细胞凋亡的诱导作用,为探讨乳腺癌治疗新方案提供了实验依据。

[关键词

]乳腺癌细胞; R I; i N促分裂原活化蛋 8/ T A L s A; R细胞外信号调节激酶一激酶 3 ME K ) ( K 3;凋亡 [中图分类号] R 3 .;R 3 .4 77 9 70 5[文献标志码] A [文章编号] 10— 5 (0 8 0 -5 20 0 73 X 2 0 )60 5 -5 8

M EKK3-a g t d i t r ee sRNA c m b ne wih o i d t TRAI L i uc s p p o i o b e s nd e a o t ss f r a t c nc r c l ln CF- a e el i e M 7 L U h u g i I S o—u’

,

LU L i, HO ioj n, UO S a—u ( .D p r n fG n rl ug r, nhP o l si l I e Z U X a—a G h ny 1 e at t e ea rey Nit e pesHopt i me o S a

o h n h i c o l f d c e h n h i io n n v ri,S a g a 0 0 , hn; .S a g a K y L b rtr f fS a g a,S h o o Me ii,S a g a J t gU iest n a o y h n h i 0 1 C ia 2 h n h i e a o ao o 2 1 y So tlg tmaoo y,De at n fOrla d M a i oa ilS rey,Nit e p e s Ho p tl o h n h i S h o f Me iie, p rme to a n xl fca u g r l n h P o l s i fS a g a, c o lo d cn a

S a g a Jatn nvri,S a g a 2 0 1 hn ) h n h i ioo gU iesy h n h i 0 0,C ia t 1

[ bt c] O jc v: oi et a epo on f c o sec gmt e— t a dp t n E K k aekns 3 A sat r bet e T vsgt t r t geet f ini i gna i t r e/ R i s i e i n i eh m i f l n o cv e o i n a ( K 3 )eeo R I n ue pp s f rat acr F7cl, o s o er r oe c n a t a et ME K gn nT AL—i cdaot io bescne MC - e s s a hf nvl l i lr t n d os l a ts c o a

i c e m srt g o ra tc n e .M eh d tae y frb e s a c r t o s:TRAI s u e o te tMCF一 el n h rwt n i i o fM C 7 c l s L wa s d t ra 7 c lsa d t e go h i hb t n o F- el wa i s

d tr n d b eh l haoy tt zl m (MT )asy C e c l snh s e mal nefr gR A (sR A )tr eemie yam ty tizl er oi l a u T sa . h mia y y tei ds l itr i N l z en iN a— g t gMEKK3 wa rn fee no M C 7 el sn a ma EC T a se t n r a e t n h x rs in o ei n sta se td it F- c l u ig Dh r F T r n fci e g n,a d te e p e so fMEKK3 s o mRNA n rti sd tce yRT— CR n etr ltig h r l eain a d a o t sso a d p oenwa ee td b P a d W se nb ot .T ep oi rto n p po i fMCF- el r n n f 7 c l weea - s

aye yMT n o yo t (F M )atrt am n t K 3一i A cmbn dw t R L Reut: R L lzdb T a d f w ctmer l y C f et e t hME K s e r wi RN o ie i T AI . s l T AI h s i hbtd t ep oieain o CF 7 c l,b tt ei hbt r fe twa a .Trn fein wi EK一i n i i h rlfrto fM e一 el s u h n ii yefc swe k o a se t t M o h K3 sRNA fe tv l efciey

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M K 3s N o vrl i iidte rle tno MC - cl o pr i R I oe( 00 ) bs e, E

K一 R Am r s ee hb e of a o f F7 es m a dwt T A La n P< .5; ei s i ee yn t h p iri lc e h l d tecmbn t nas ce sdtea o tss aeo F 7cl P<0 0 ) h o iai l i rae p poi rt f o on h MC - el s( . 5 .Co cu in: i n igo K 3 gn i n ls o Sl cn f e ME K e ewt h sRNA a ral rmoeTRAI i d c d a o t sso ra tc n e el i c n ge t p o t y L—n u e p po i fb e s a c rc lsMCF 7,whc a sa x ei na o n ain一 ih ly n e p rme tlfu d t o o e rame tmeh d o ra tc n e . frn w te t n t o fb e s a c r

[ e od] bes cne cl; R I;s N;m t e—cvt r e/ x ae u rs nl eua dkns— K yw rs r t acr e T A L i A a l R i gnat a dpo i et cl l i a rgle i e o i e tn r la g t a kns 3 M K 3; ppoi iae ( E K ) aot s s『 h acr i hr 2 0, 5 6: 5 -5] C i JC ne Bo e, 0 8 1 ( ) 5 25 6 n t [基金项目】上海交通大学科技发展基金资助项目( o0 x20 2。Sp o e yteSineD vlp et r rm o h nhi i tn n e— N .5j12 ) upa db cec ee m n o a f ag a J oogU i r h o Pg S a v sy N .5j12 ) i ( o0 x 0 2 t 2

[作者简介]刘寿贵 (9 2,, 18 .)男福建省宁德市人,硕士研究生,主要从事乳腺癌基础和临床的研究, - all sogi@yho cm.n E m i i hu u1 ao.o c:u Co r s o d n u h r E- i:g o h u@ s n . on re p n i g a t o . ma l u s y ia ci

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