板栗的分子标记及育种研究概况

落叶果树

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Z( ) 5 X

(3 )

板栗的分子标记及育种研究概况 苑克俊刘庆忠 (山东省果树研究所 : ,

,

泰安 2 7 、

10[ X ))

摘 S 、

要概述了板果的 ,

D NA

提取方法

、

R A PD

反应技术体系遗传多样性和品种鉴定栗疫病与分子标记 ,

、

育种等方面的研究进展指出今后在板果研究中应学习其他植物上的标记新技术注意开发 R C A巧以及新型的 SN P

SC A R

、

A FL P

、

等分子标记技术

。

关键词:板采; D N A;分子标记; R A PD;育种

中图分类号:

肠麟

.

2

文献标识码:

B

文章编号

:

10 2

一

2 9 1 0 (2加 5 )0 3

一

0

13

一

3 0

板栗栽培历史悠久资源丰富 、,

,

。

近年来在

,

项艳〔〕等通过对几种提取方法获得的板 ’

板栗的遗传多样性分析品种鉴别等方面已逐步应用了分子生物学技术开展了分子标记与分子标记育种等方面的研究工作 1 DNA 。

栗基因组

D NA

质量分析认为提取液中加入酚 -

,

v in y lP结合剂可溶性聚乙烯毗咯烷酮 ( P y而 l y o

d i l 。

的提取 DNA

提取

是进行分子生物学研究的基础 .

法能满足 R A PD及其他分子生物学研究的需 l s要[他们用高盐低 p H值法所获得的 D N A ,

~

,

PV

)的改良 SD S法是最理想的提取方 P

。

植物幼嫩组织中

D NA

含量高次生物质少故 D NA 。

,

,

浓度为 2 5 不高 ;

林岁 m L

,

其

A Z,/ A Z,

值为 .

1

.

5 6

,

纯度微 ,

一般选取植物的嫩叶提取 ,

由于板栗营 。

用

CT AB ,

法所获得的

DNA ;

浓度为 Cui de t 10 8林g/

养组织中酚类化合物和单宁等次生物质含量高 D NA的提取和纯化非常困难川沈永宝等

2 3 5卜『 m L

其

A,/ A,

值为 .

2 11

用 一

量制备 m L ,

D NA

法所获得的 。

D NA ;

浓度为

研究表明用

,

C

A T

B

法提取板栗冬芽嫩叶半 ,

、

、

其

8 A Z印/ A 2

值为 .

2

13

用氯仿

异戊醇

木质化韧皮部和老枝韧皮部的 D N A时加 6% p二琉墓匕醉可较容易地提取且 D N A的纯度较

核糖核酸酶法所获得的 D NA浓度为 9 3

林岁 m L

其 g ,

A Z印/ A Z。值为 1

8 3

;

用改良 S D S法所获得的 ,

值高于 1 8可满足分子标记实;验的要求对于成熟叶片则 D N A的纯度较低 高其 , .

A,/ A,

,

DNA

浓度高达 Z印 ,

9 1 8卜梦 m L D N A .

产率 ,

12 2 4林盯 .

,

,

其A

/ A Z。二 1

4 9

>

1 8 .

,

效果较理想

。

他们 。

且带有褐色

。

但经过两次酚抽提后

.

,

A姗/ A2 0 8

认为通过调节提取液的渗透势使之与细胞核

值也能达到 D NA

1 7以上 ,

{’]

。

他们认为板栗叶片 ,

,

内的渗透势保持平衡可防止细胞核破裂 胞核裂解前在提取液中加人 ,

,

细 。

中含酚量高保温时极易氧化是导致提取 失败的主要原因必须在提取液中加大抗 一 ,

2% Pv P 、

可将细

胞质中的酚类等杂质与细胞核分开排除污染

氧化的 p

琉基乙醇的用量

。

用 CT A B和 SD S 。

加人 2

.

5%

p ,

一

琉基乙醇的提取介质可有效防 D NA

,

法提取 D NA的效果差别不大 : :

止氧化褐变所提取的

絮状沉淀颜色最

收稿日翔

2以H

一

12

一

30 一

96作者简介苑克俊 ( 1 3

)男山东营县人博士研究员从事果品贮藏和分子标记定位基因研究工作 ,, ,

,

,

。