公共场所微生物检验作业指导书02-05

作 业 指 导 书 公共场所毛巾、床上卧具微生物 检验方法大肠菌群测定操作规程

编号：ZQCDC/ZY02 第1页 共1页 第 1 次修订 实施日期：2011 年 5 月 1 日

1、目的 依据 GB/T18204.2—2000 公共场所茶具微生物检验方法大肠菌群测定，熟 练掌握此规程，保证检验结果的准确性。 2、适用范围 本标准规定了公共场所公用毛巾、床上卧具大肠菌群的测定方法。 3、责任 使操作者熟悉此规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结果准确性。 4、内容： 4.1 定义：大肠菌群 指一群在 37℃、24h 能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌痒的革兰 氏阴性无芽胞杆菌。 该菌主要来源于人畜粪便，故以次作为粪便污染指标来评价公用毛巾、床 上卧具的卫生质量。 4.2 仪器：见 GB/T 18204.3—2000 中第 3 章。 4.3 培养基和试剂：见 GB/T 18204.3—2000 中第 4 章。 4.4 检验程序：见 GB/T 18204.3—2000 中第 5 章。 4.5 操作步骤 4.5.1 采样方法 4.5.1.1 随机法：随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。 4.5.1.2 涂抹法：用测定细菌总数时采集的样品，无需重采。 4.5.1.3 纸片法：用灭菌生理盐水湿润 5cm×5cm 大肠菌群快速测定纸片两 张，分别贴在毛巾、床上卧具规定部位和面积范围内，约 30s 后取下，置于无 菌塑料袋内。 4.5.2 检验方法 4.5.2.1 发酵法 4.5.2.1.1 用测定细菌总数剩余的检样，倒入双料乳糖胆盐发酵培养液中。 置 36℃±1℃培养箱内培养 24h。 4.5.2.1.2 观察是否产算、产气，若有变黄和气体产生，该管推测是检验 阳性。如不产酸、产气则为大肠菌群阴性。 4.5.2.1.3 自推测性检验阳性管中取一接种环培养液，转种伊红美蓝琼脂 平板上，置 36℃±1℃培养箱培养 18~24h,然后取出，观察菌落形态，并做革 兰氏染色和证实性试验。 4.5.2.1.4 在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落 1~2 个进行染色镜检； 同时接种乳糖发酵管，只 36℃±1℃培养 24h。 4.5.3 纸片法 将已采样的纸片置 36℃±1℃培养箱内培养 16~18 h,观察结果。 4.6 结果报告 见 GB/T18204.3—2000 中第 7 章。