微生物(酵母)的培养基优化

微生物(酵母)的培养基优化

实验一 微生物(酵母)的培养基优化

(指导教师:汪文俊 熊海容 王海英 肖新才 实验员: 张继泰) 一．实验目的：

掌握微生物斜面培养基、种子培养基及发酵培养基确定方法，学会对已确定菌种确定实验室发酵工艺。

二．实验原理

生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。由于酵母在液体深层通气发酵过程中是以均一混浊液的状态存在的，所以可以采用直接比色法进行测定。

三．仪器与试剂

全恒温振荡培养箱，分光光度计、电热恒温水浴槽、天平、电炉。试剂为葡萄糖、蔗糖、酵母浸粉、KH2PO4。 四．实验方法

(1)、培养基的配制(见表1,2)

表1 正交表试验设计

因素水平

1 2 3

葡萄糖 1.0 2.0 3.0

蔗糖 0.0 1.0 2.0

酵母膏 0.5 1.0 2.0

KH2PO4 0.5 1.0 2.0

表2 正交表实验方案

编号

葡萄糖 (A)

蔗糖 (B)

酵母膏 (C)

KH2PO4

1

生物量 （OD）

24h

36h

48h

60h

（D） h 2h

1 2 3 4 5 6 7 8 9

(1) (1) (1) (2) (2) (2) (3) (3) (3)

(1) (2) (3) (1) (2) (3) (1) (2) (3)

(1) (2) (3) (2) (3) (1) (3) (1) (2)

(1) (2) (3) (3) (1) (2) (2) (3) (1)

（2）将上述培养基配制好以后，每250 ml三角瓶装入培养基100 ml，于121℃下灭菌30 min，冷却。

（3）冷却后接种（接种量为5％），置于28℃培养箱进行培养。