实验一 荧光物质稀溶液的激发、发射和同步荧光光谱测定
一. 实验目的
1.学习荧光分析法的基本原理和LS-55B发光分析仪的操作。 2.学习同步荧光的操作,了解同步荧光的优点。 二. 实验原理
荧光是分子从激发态的最低振动能级回到原来基态时发射的光。利用物质被光照射后产生的荧光辐射对该物质进行定性分析和定量分析的方法,称为荧光分析。
在一定光源强度下,若保持激发波长 ex不变,扫描得到的荧光强度与发射波长 em的关系曲线,称为荧光发射光谱;反之,保持 em不变,扫描得到的荧光强度与 ex的关系曲线,则称为荧光激发光谱。在一定条件下,荧光强度与物质浓度成正比,这是荧光定量分析的基础。荧光分析的灵敏度不仅与溶液的浓度有关,而且与紫外光照射强度及所选测量波长等因素有关。
苯酚由于其共轭结构,有荧光活性,可以用荧光分析法测定。它们的激发光谱和发射光谱有互相重叠的现象。对于复杂组分,当激发光谱和发射光谱有互相重叠的现象时,可以用同步荧光扫描,同步扫描荧光光谱技术可以简化、窄化光谱,提高选择性。 三. 实验仪器和试剂 1. LS-55型发光谱仪;
2. 移液枪(德国BRAND公司生产); 3. 50ml容量瓶,25ml容量瓶10支; 4. 苯酚储备液:960mg/L 5. 去离子水; 四. 实验内容 1.预扫描(pre-scan)
用储备液配制浓度为10ppm(mol/L)的工作液,设定仪器参数,进行全波长预扫描,并记录扫描结果,得出最大激发和发射波长,同时查看其瑞利散射波长、以及双倍频峰波长。
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