分子生物学技术在猪瘟诊断中的应用

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动物医学进展,2009,30(2):1062108ProgressinVeterinaryMedicine

专论与讲座

分子生物学技术在猪瘟诊断中的应用

毕保良,李进涛,刘旭川,张以芳3

(云南农业大学动物科学学院,云南昆明650201)

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　　摘　要:猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、发热性、接触性传染病,。随着对猪瘟病毒研究的深入,猪瘟在一定程度上得到有效的控制。但是近年来,、临床症状和病理变化等方面出现了一些新的变化,一些欧洲国家又报道有猪瘟发生。,给养猪业造成极大的经济损失。,为猪瘟的及时诊断提供参考。　　关键词:猪瘟;诊断技术

中图分类号:S852.文献标识码:B

文章编号:100725038(2009)0220106203

　　猪瘟(Classicalfever,CSF)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(CSFV)引起猪的一种急性、发热性、接触性传染病,可引起各种年龄猪发病。猪瘟在世界养猪国家有不同程度的流行,世界动物卫生组织(OIE)将其确定为必须报告的传染病,并列为重要的检疫对象,猪瘟也是我国农业部规定的一类传染病。有关猪瘟的研究已开展多年,使其在一定程度上得到有效控制。我国在1955年就成功研制出世界公认的有良好免疫效果的猪瘟兔化弱毒疫苗,至今已应用了半个世纪,对我国以及引进兔化弱毒苗的国家的猪瘟疫情控制做出了积极贡献,并得到了高度评价,至今我国没有出现大面积猪瘟疫情暴发,有的国家使用此苗消灭了猪瘟[1]。但是近些年来,世界各养猪国家流行的猪瘟在流行病学、临床症状和病理变化等方面出现了一些新的变化,猪瘟的防控出现了许多新情况。20世纪60年代英国在扑灭猪瘟的过程中就证明大部分猪瘟病例属于温和型或隐性感染;我国在20世纪70年代后期也发现猪瘟的流行形式发生了很大变化,表现为病程由急性变为慢性过程,临床症状由典型变为非典型的温和型猪瘟,症状显著减轻,发病率不高,病势较缓和,仔猪死亡率较高,成年猪症状较轻或可耐过,死亡率较低,病理变化也不明显。我国在20世纪80年代以后,随着规模化养猪业的迅速发展,使得猪瘟在全国呈现出区域性、散发性流行,而且在许多地方出现

了所谓“非典型猪瘟”和猪瘟病毒的持续感染、垂直感染、母猪繁殖障碍以及难以解释的免疫失败等现象,给养猪业造成极大危害[223]。因此,本文综合阐述了猪瘟的分子生物学诊断技术的研究,为及早和及时诊断猪瘟提供参考。

1　常规反转录2聚合酶链反应

在临床病料检测中,要经常检测RNA病毒,而通常所用的PCR试剂盒中的是DNA聚合酶,不能以RNA为模板直接扩增,故在进行PCR前,先将病毒RNA逆转录为cDNA,因此建立了RT2PCR技术。随着人对猪瘟病毒分子生物学研究的深入,尤其是猪瘟Alfort株和Bresica株基因组全序列的成功测定,使RT2PCR技术在猪瘟的研究中被广泛应用。RT2PCR作为检测CSFV的一种方法,其特异性强、灵敏度高、重复性好,操作也很简单,整个过程在1d内即可完成,能达到快速检测的目的,并且适合于各种含毒材料的检测,也可用于临床。此外,RT2PCR技术还可区别与猪瘟相关的病毒,如BVDV以及能引起和猪瘟相似临床症状的猪病的病

毒,如亚洲猪瘟病毒、伪狂犬病病毒,其灵敏度可达100%。

2　基因芯片检测技术

基因芯片指在一个很小的表面,通常是硅化玻璃,覆盖有成千上万的寡核苷酸,每一个固定在芯片

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收稿日期:2008208228

基金项目:云南省教育厅科学研究基金资助(08J0017)

作者简介:毕保良(1977-),男,云南寻甸人,硕士,主要从事动物微生物与免疫学研究。3通讯作者