脂多糖诱导小鼠巨噬细胞系RAW264_7细胞的活化凋亡作用

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中国生物制品学杂志2009年2月第22卷第2期ChinJBiologicalsFebruary2009，Vol.22No.2

中国图书分类号Q255文献标识码A文章编号1004-5503（2009）02-0136-03

【基础研究】

脂多糖诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的活化凋亡作用

周静1王轶楠1柳忠辉1冯野2陈芳芳1台桂香1

【摘要】目的探讨脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞活化凋亡的作用。方法体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，分别用0.5、1.0、2.5μg／mlLPS刺激RAW264.7细胞24h，一氧化氮（NO）试剂盒检测细胞培养上清中NO水平；用1.0μg／mlLPS分别刺激细胞3d和6d，台盼蓝拒染法检测细胞增殖情况；用1.0μg／mlLPS刺激细胞6d，流式RAW264.7细胞培养上清中NO含量明显增加，且具有剂量细胞术分析细胞周期及细胞凋亡情况。结果经LPS刺激后24h，

依赖性；LPS刺激3d和6d后，细胞的增殖均受到抑制，且呈时间依赖性；LPS刺激6d时，细胞周期被阻滞在S期，并出现明显的凋亡。结论LPS具有诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞活化凋亡的作用。【关键词】脂多糖；巨噬细胞；活化凋亡

Activation-Induced

Lipopolysaccharide

ApoptosisofMouseMacrophageRAW264.7by

ZHOUJing△,WANGYi-nanLIUZhong-hui,etal（△DepartmentofImmunology,NormanBethuneCollegeofMedicine,JilinUniversity,Changchun130021,China）

【Abstract】ObjectiveToexploretheroleoflipopolysaccharide（LPS）inactivation-inducedapoptosisofmousemacrophageRAW264.7.Methods

RAW264.7cellswereculturedinvitroandstimulatedwithLPSatdosagesof0.5,1.0and2.5μg／ml

for24hrespectivelyanddeterminedfornitricmonooxide（NO）levelinculturesupernatantbyNOkit.Thecellswerestimulatedwith1.0μg／mlLPSfor3and6drespectivelyanddeterminedforproliferationlevelbytrypanbluedyeexclusionmethod.Thecellswerealsostimulatedwith1.0μg／mlLPSfor6dandanalyzedforcellcycleandapoptosisbyflowcytometry.ResultsAfterstimu－lationwithLPSfor24h,theNOlevelinculturesupernatantofRAW264.7cellsshowedadose-dependentincrease.AfterstimulationwithLPSfor3and6d,theproliferationofRAW264.7cellswasinhibitedinatime-dependentmode.AfterstimulationwithLPSfor6d,thecellcyclewasblockedatSphase,andobviousapoptosiswasobserved.ConclusionLPSplaysanimportantroleinactiva－tion-inducedapoptosisofmousemacrophageRAW264.7.

【Keywords】Lipopolysaccharide（LPS）;Macrophage;Activatedapoptosis

脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革兰阴性菌细胞壁的主要成分，也是其致病的主要物质基础。LPS是诱导单核／巨噬细胞活化、成熟的主要物质，可通过刺激单核／巨噬细胞产生并释放大量的一氧化氮（NO）、IL-1β以及肿瘤坏死因子-α（Tumornecrosisfactor-α，TNF-α）等炎症因子参与机体急性期应答，引起机体炎性损伤［1~5］。

单核／巨噬细胞介导的炎症反应不是无限制的进行，通过机体自我调控可以终止炎性反应，但其确切机理尚不清楚。

研究发现，LPS短时间刺激可以活化小鼠巨噬细胞分泌NO及IL-1β，而过量的NO又是细胞凋亡

7］

的诱导因子［6，。因此推测作为炎性反应的启动因

基金项目：国家自然科学基金（30571688，30671953，30801005）.

作者单位：1吉林大学白求恩医学院免疫学教研室（长春

130021）；2吉林大学中日联谊医院外科（长春

130031）.通讯作者：台桂香，E-mail：taiguixiang@163.com

素，LPS有可能通过诱导单核／巨噬细胞产生过量

而诱导其活化凋亡，进而终止其介导的炎症的NO，

反应。本文观察了LPS长时间刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞后，对其增殖及凋亡的影响，现将结果报道如下。

1.材料与方法1.1细胞