类风湿性关节炎患者2H4_T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析[1]

132 类风湿性关节炎患者2H4T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

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吴福国　邱翠娥　韩晓琳　朱立平　蒋　明　(山东济宁医学院生化教研室,济宁272113)

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中国图书分类号　R593.2　R392

摘　要　目的:了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化,探讨其发病机制。方法:使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对11例RA患者和12例健康人的外周血T淋巴细胞进行了研究。结果:RACD3+T细胞和CD4+

T细胞无明显变化,CD8T细胞明显减少,CD4ΠCD8比值增加。CD42H4T细胞在CD4,而CD4

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4B4T细胞的比例增加。进一步研究发现,RA患者活化的CD25T,RA患者IgG

含量显著增加,IgM和IgA含量与正常组比较无明显差别。结论:RA,而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助性T淋巴细胞升高,抑制性TT,因此,T淋巴细胞亚群比例失衡在RA关键词　类风湿性关节炎　T　Analysisofintheperipheralbloodofpatientswithrheu2matoidWUFu2Guo,QIUCui2E,HANXiao2Linetal.DepartmentofBiochemistry,JiningMedicalCollege,Shandong272113

Abstract　Objective:ToexplorethephenotypiccharacteristicsofTlymphocytesubsetsintheperipheralblood(PB)ofpatientswithrheumatoidarthritis(RA).Methods:Tlymphocytesubsetsin11patientswithRAand12healthycontrolswereanalyzedbyusingsingleand2colorfluorescenceflowcytometry.Results:(1)RApatientsweresimilartohealthycontrolsinthepercentagesofCD3cellsandCD4cellsin

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PB,butthepercentageofCD8cellswassignificantlylower(P<0.05)andtheratioofCD4cellstoCD8cellswassignificantlyhigher

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(P<0.01)inthepatientswithRA.Inaddition,thepercentageofCD25+cellswasalsoincreasedcomparedtothatinPBfromhealthycon2

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trols.(2)ThepercentageofCD42H4cellsamongCD4cellsinPBfrompatientswithRAwasmarkedlydecreased(P<0.01),butthe++

percentageofCD44B4cellswassignificantlyincreased(P<0.01)comparedwiththatinPBfromhealthycontrols.(3)SerumIgGcon2

centrationsinRApatientsweresignificantlyhigherthanthatinhealthycontrols.However,therewerenosignificantlydifferencesbetweenRApatientsandhealthycontrolsintheserumIgMandIgA.Conclusion:ThecombinationoftheincrementinhelperTcells,thereductioninsup2pressorTcells,andtheincrementinactivatedTcellsmayleadtoexcessiveproductionofautoantibodiesinRApatients.

Keywords　Rheumatoidarthritis　Tlymphocytesubsets　Immunoglobulin　Flowcytometry

类风湿性关节炎(RheumatoidArthritis,RA)是一种病因复杂的自身免疫性疾病,其发病机制至今还不清楚。许多学者认为T淋巴细胞亚群比率异常在RA

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发病机制中可能具有重要作用。但这种异常在类风湿性关节炎患者中尚无一定的规律。鉴于此,本文利用流式细胞仪技术对11例RA患者外周血淋巴细胞亚群进行了检测,并观察了其血清免疫球蛋白含量的变化,以寻找其免疫功能紊乱的证据,揭示细胞和体液免疫功能异常在RA发病机制中的意义。

①中国医学科学院基金资助②中国医学科学院基础医学研究所单克隆抗体研究室,北京100005③北京协和医院内科,北京100730

作者简介:吴福国,男,34岁,副教授,硕士研究生,主要从事风湿病

的分子发病机制和诊断研究;

朱立平,男,60岁,研究员,博士生导师,主要从事细胞和分子免疫学研究,特别是淋巴细胞分化抗原的分子生物学研究

1　材料与方法

1.1　研究对象　12例正常对照为本室自愿献血

者,男5例,女7例,年龄19～50岁,平均34岁。11例类风湿性关节炎患者为北京协和医院内科临床免疫及风湿病学组门诊病人,均符合美国风湿病学会1982年RA的分类标准,其中男3例,女8

例,年龄24～72岁,平均46岁。均处于活动期。检测前均未

服用对免疫功能有影响的药物如糖皮质激素等。1.2　主要试剂　CD3,CD4和CD8单克隆抗体试剂由中国医科院基础所单抗室提供。抗Tac,MsIgG12RD1,MsIgG2FITC,T42FITCΠ2H42RD1单克隆抗体为美

国Coulter公司产品。FITC标记兔抗鼠IgG为卫生部北京生物制品研究所产品。免疫球蛋白IgG、IgM和IgA单向扩散定量检测板和标准曲线是由北京科