脂质体转染试剂
Lipotap脂质体转染试剂
产品编号
产品名称
包装
脂质体转染试剂产品简介:
Lipotap脂质体转染试剂(Lipotap Liposomal Transfection Reagent)是一种适合于把质粒或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸,以及核酸蛋白复合物或带负电荷的蛋白转染到培养的真核细胞中的高效阳离子脂质体转染试剂。Lipotap还可以进行活体动物的细胞转染,用于基因治疗等。
为了实现在真核细胞中高效转染的目的,磷酸钙沉淀法、脂质体、阳离子聚合物、病毒、显微注射、电转等许多方法被发展起来。但这些方法存在一个或多个缺点,包括有细胞毒性、重复性差、操作烦琐、转染效率相对较低或价格非常昂贵等。
碧云天独立研发的Lipotap脂质体转染试剂,尽量避免了上述缺点,实现了无明显细胞毒性、重复性好、操作简单、转染效率较高,并且价格非常优惠。用Lipotap转染细胞后,对于大多数细胞,72小时内不更换培养液无明显细胞毒性。
Lipotap转染试剂是一种经过精心优化配制的阳离子脂质体。Lipotap不仅适用于常规的质粒转染,也适用于siRNA转染。 和其它一些阳离子脂质体不同的是,使用Lipotap转染时血清的存在不影响转染效率,这样可以减小去除血清对细胞的损伤。
Lipotap对于贴壁细胞和悬浮细胞均适用,并且可以用于稳定表达细胞株的筛选。 Lipotap的转染效率可以通过转染表达EGFP或其它荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
关于不同的细胞转染试剂的主要特点和差异方面的比较,以及如何选择适当的细胞转染试剂,可参考碧云天的相关网页:doc.guandang.net。
对于六孔板而言,一个包装的本转染试剂可以转染40个孔。
包装清单:
产品编号 C0520 -
产品名称
Lipotap脂质体转染试剂
说明书
包装 0.6ml 1 份
保存条件:
4℃保存,一年有效。
注意事项:
1.
使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒,可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提,以保证可以获得较高的转染效率。 转染前细胞必须处于良好的生长状态。
需自备不含抗生素和glutamine的DMEM溶液。 Lipotap不能vortex或离心,宜缓慢晃动混匀。
Lipotap使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养(以六孔板为例,其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作):
在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)培养到六孔板内,使第二天细胞能达到约70-80%满。
在进行下述转染步骤前,把六孔板每孔内换成新鲜的细胞培养液。培养液的体积约为2ml左右,可以含有血清和抗生素。 把Lipotap脂质体转染试剂轻轻混匀。
参考下表,对于待转染的六孔板中一个孔的细胞,在一洁净无菌离心管内依次加入适量不含抗生素和glutamine的DMEM溶液,15μl Lipotap,及2.5μg DNA,使最终体积为75μl,用枪轻轻吹打混匀。注意:不可Vortex或离心。
使用说明:
2. 3. 4.
DMEM Lipotap DNA Final volume
One well for 6-well
(60-x)μl 15μl
xμl (2.5μg) 75μl One well for 24-well
(15-x)μl 4μl xμl (0.6μg) 19μl 60mm dish(120-x)μl 30μl xμl (5μg) 150μl 100mm dish (240-x)μl 60μl xμl (10μg) 300μl
按 Lipotap 脂质体转染试剂说明书操作, BCSC1 组转染 HisBBCSC1, 空载体组转 重组质粒 pcDNA3. 1 / v5HisB , 7402 染对照质粒 pcDNA3. 1 / v5野生型组 ...
目的本研究将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)经lipotap脂质体转染作用于肝癌细胞系BEL-7402,观察其对肝癌细胞端粒酶活性的影响,同时检测其对...
方法PS-ASODN经lipotap脂质体转染作用于NCI-H292细胞,采用MTF法、ELISA法和流式细胞术检测NCI-H292细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①...
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