实验室常用梅毒检测方法的评价

梅毒检测方法

第６期孟德娣。等实验室常用梅毒检测方法的评价

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４梅毒螺旋体ＥＬＩＳＡ试验（ＥＬＩＳＡ）

梅毒螺旋体ＥＬＩＳＡ试验是随着近年梅毒螺旋体基因工程的研制成功而发展起来的一种血清学检测方法，是利用重组梅毒螺旋体ＴＰ４７、ＴｍＰＡ抗原包被微孔板和辣根过氧化物酶标记的ＴＰ４７、ＴｍＰＡ抗原夹心法检测血清中的梅毒特异性抗体¨Ｊ，该试验使用基因工程方法制备重组抗原代替以往使用的野生型梅毒螺旋体抗原，易于纯化，极大提高了试验的敏感性和特异性。目前，虽然梅毒ＥＬＩＳＡ试验的临床应用依然存在争议¨。９１，但ＥＬＩＳＡ法具有诸多其他检测方法不可比拟的优点，仍然得到广泛的使用。ＥＬＩＳＡ试剂廉价，试验方法操作简便，敏感性、特异性高，稳定性好，不受溶血和纤维蛋白影响，可自动化进行，结果清晰，并可与全自动免疫分析系统结合进行加样检测与分析，采用电脑软件处理、保存、传输数据，使检测更客观准确，数据管理更规范化，是目前梅毒血清学诊断试验的首选方法。需注意的是ＥＬＩＳＡ法检测时，如果血清中梅毒抗体浓度过高。会产生钩状效应¨…。对于大型采供血机构来说，进行大量血液样本筛查．可利用ＥＬＩＳＡ和ＴＲＵＳＴ两种方法的互补来提高梅毒的检出率和准确性，保证血液质量，同时也可以最大限度地避免不必要的血液资源浪费，以及消除假阳性给无偿献血者造成的精神

压力…】。

５荧光密螺旋体抗体吸附试验（ＦＴＡ—ＡＳＳ）

ＦＴＡ—ＡＢＳ试验以完整形态的Ｎｉｃｈｏｌ梅毒螺旋体作为抗原，空气中干燥，丙酮固定，加上经吸收剂（用非致病性密螺旋体Ｒｅｉｔｅｒ株提取制备而成）处理过的病人血清（去除非特异性蛋白，提高特异性），再加入荧光素一异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记的抗人免疫球蛋白，与血清梅毒螺旋体抗体结合¨“。在荧光显微镜下，螺旋体均匀地发出中等或高强度的苹果绿色荧光为阳性，均匀地发出弱苹果绿色荧光为弱阳性，呈微弱黄色光或观察不到荧光为阴性。ＦＴＡ—ＡＢＳ试验虽然操作过程复杂，但具有高度特异性和敏感性，在第一期梅毒前几天即可测出特异性抗体，是目前诊断梅毒的金标准。但是它有一些局限性，是客观检测但难以标准化，在合并抗人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染时ＦＴＡ—ＡＢＳ有假

阳性‘１３１。

６

ＰＣＲ法

ＰＣＲ法是较新的方法，它能对生殖器溃疡进行

万方数据

早期鉴别诊断，区分梅毒、生殖器疱疹及软下疳¨“。

虽然上述血清学实验室诊断是梅毒诊断的主要方

法，但其对Ｉ期梅毒、伴艾滋病梅毒、神经梅毒等敏感性低，不能区分母体梅毒与胎传梅毒¨５。，不能判断传染性。ＰＣＲ法在Ｉ期梅毒的诊断中灵敏性高

于血清学方法，其原因是机体感染梅毒后须３—４周

才产生抗体¨“。梅毒螺旋体现在还不能人工培养，检测ＴＰ主要有暗视野或直接荧光染色（ＤＦＡ）镜检，ＰＣＲ试验在此情况下显示其独特的优越性。但当前诊断梅毒的ＰＣＲ仍存在引物的非特异性、对血

清／全血、ＣＳＦ等敏感性低等缺点Ⅲ１。而且当皮损

开始愈合、分泌物减少、血清学试验阳性反应时，采用ＰＣＲ方法就不合适¨“。另外，ＰＣＲ方法易受标本中的组织和细胞碎片等物质抑制，导致ＰＣＲ假阴

性结果‘１９３。

除上述几种常用方法外，梅毒快速检测试纸条也逐步在各实验室得到了认可和应用。快速检测试纸条虽克服了检测时间长、试剂昂贵等缺陷，但国内暂时未有详细报道其灵敏性和特异性效果，因此不可用于确诊试验旧”２２。。

采用ＲＰＲ、ＴＲＵＳＴ进行初筛，初筛阳性者根据具体情况和实验室条件采用ＥＬＩＳＡ、ＦＴＡ—ＡＢＳ、ＴＰＨＡ、ＰＣＲ等方法进行确认试验是目前而言简便、行之有效的诊断策略。随着科技的飞速发展，梅毒螺旋体的诊断方法日新月异，可选用方法除以上外。还有许多可借鉴的技术，如胶体金免疫层析法（ＧＩ—ＣＡ）、免疫印迹试验等。各种方法都有独特的优点和缺点，检验人员应从具体情况出发，因地制宜，发展和完善梅毒诊断方法，指导临床及时治疗梅毒患者，对控制梅毒的蔓延有重要意义。参考文献：

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