Galanin甘丙肽及其受体在成年小鼠脑内神经新生部位的表达及对神经干细胞分化的作用

Galanin甘丙肽及其受体在成年小鼠脑内神经新生部位的表达及对神经干细胞分化的作用

第４１卷第５期分子细胞生物学报

Ｖ０１．４１，Ｎｏ．５２００８年ｌＯ月

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ

Ｏｃｔｏｂｅｒ２００８

Ｇａｌａｎｉｎ（甘丙肽）及其受体在成年小鼠脑内神经新生部位的表达

及对神经干细胞分化的作用

马

骥

单良于玲莉袁崇刚’

（华东师范大学生命科学学院生理学研究室．上海２０００６２）

摘要Ｇａｌａｎｉｎ（甘丙肽）是一种在中枢神经系统中广泛分布的神经肽。功能涉及摄食、睡眠和觉醒、疼痛、认知和生殖等各方面。我们在成年小鼠脑的神经细胞新生部位如ＳＶＺ。ＤＧ和ＲＭＳ发

现有ｇａｌａｎｉｎ魔其受体的ｍＲＮＡ表达，同时在Ｓ、亿来源的神经干细胞中也检测到有烈锄ｉｎ及其受

体的表达。细胞实验中。在分化后特定时间段ＧＡＬＫＯ小鼠来源的神经干细胞产生神经突的细胞比例及神经突的长度明显小于正常小鼠来源的神经干细胞．而加入ｇａｌａｎｉｎ或受体激动剂ＧＡＬ２—１１后，该神经干细胞则在产生神经突的细胞比例及神经突的长度都明显上升。受体拮抗剂Ｍ３５的添加可减弱ｇａｌａｎｉｎ或ＧＡＬ２—１ｌ所产生的作用。这些结果表明ｇａｌａｎｉｎ及其受体与神经干细胞的分化及神经突的生长有着密切的联系。并可能参与了神经系统的发育。

关键词：

ｇａｌａｎｉｎ

ｇａｌａｎｉｎ受体ｍＲＮＡ表达神经干细胞神经突生长

万方数据

Ｇａｌａｎｉｎ（甘丙肽）是由２９—３０个氨基酸构成的神经肽，广泛分布于中枢和周围神经系统。它１

方法与材料

在下丘脑周围核群．丘脑、杏仁核、蓝斑、隔核１．１动物

等中枢区域都有着较强的表达［１．引．主要参与递质Ｃ５７ＢＵ６Ｊ小鼠购自上海西普尔一必凯实验动物

释放、摄食、睡眠与觉醒、疼痛和生殖等方面生中心．以此品系为基础构建的Ｇａｌａｎｉｎ基因敲除理功能的调节［３－１０］。Ｇａｌａｎｉｎ的功能由３种Ｇ蛋白（ＧＡＬＫＯ）小鼠获自澳大利亚墨尔本大学Ｈｏｗａｒｄ结合受体介导：ＧＡＬ－－Ｒ１．ＧＡＬ－Ｒ２和ＧＡＬ－Ｒ３ｔ１１∞】。Ｆｌｏｒｅｙ研究所Ａｎｄｒｅｗ．ＬＧｕｎｄｌａｃｈ教授馈赠。动物近来研究表明．ｇａｌａｎｉｎ还参与促进神经系统神控制饲养在２４℃。光暗１２ｈ交替的环境中。经（元）的生长．发育和再生，如在外周痛觉神经损１．２原位杂交

伤后背根神经节ｇａｌａｎｉｎ表达有较强的上调ｆ１４］：前顶以４％ｉｓｏｆｌｕｒａｎｅ麻醉８周龄的野生型成年小叶皮质切除后在丘脑和中缝背核有ｇａｌａｎｉｎ的高表鼠（ｎ＝３／组），迅速断头。分离脑并置人液氮中快达【１５】：ｇａｌａｎｉｎ能促进ＰＣＩ２细胞和背根神经节感觉速深冻，实验前所有脑组织保存于一８０℃冰箱。切神经元的神经突的伸长［１６ １７１。等等。而ｇＭａｍｎ及片时．使用Ｉ七ｉｃａ冰冻切片机在一１６℃下进行冰冻其受体的表达在大鼠脑内细胞新生部位（如Ｓｖｚ。矢状切片（１４０，ｍ）。

ＲＭＳ）的发现［１Ｓ］更使人们认为ｇａｌａｎｉｎ及其受体检测ｇａｌａｎｉｎ及其受体的寡核苷酸探针由Ｓｉｇ．与神经系统的发育和损伤修复有着密切的联系。

ｍａ—Ａｌｄｒｉｃｈ公司合成。探针经Ｇｅｎｂａｎｋ和ＮＣＢＩ／

我们通过实验检测了ｇＭａｍｎ及其受体在小鼠ＮＩＨＢｌｏｔ验证了其与ｇａｌａｎｉｎ及其受体ｃＤＮＡ的

脑内神经细胞发生部位以及神经干细胞中的表达．１００％同源性。利用末端脱氧核苷酸转移酶并应用ｇａｌａｎｉｎ受体的激动剂以及拮抗剂分别作用（ＲｏｃｈｅＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）对探针进行［咚］ｄＡＴＰ（１２００

于培养的来自正常小鼠和ｇａｌａｎｉｎ基因敲除小鼠的神经干细胞．由此来验证ｇａｌａｎｉｎ及其受体对神经本文２００８年３月１８日收到。２００８年７月２５日接受。干细胞在分化过程中的作用。

‘通讯作者：Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｇｙｕａｎ＠ｂｉｏ．ｅｅｎｕｅｃｈ．ｃｎ．Ｔｅｌ：０２１－６２２３２７２９